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用化学诱变剂N－甲基－N′－硝基N－亚硝基胍进行随机诱变，获得了穿梭启动子探测质粒pPGV5的温度抗性突变型pPGV5(tr65)，序列分析发现质粒上卡那霉素核苷转移酶基因kan的＋238位碱基发生了G→T的单点突变。以来自嗜热脂肪芽孢杆菌FDTP－3菌株的耐热邻苯二酚－2，3双加氧酶基因pheB作为报道基因，构建了转录融合质粒pGGVPB452,用高压电穿孔法将其转化嗜热脂肪芽孢杆菌，通过报道蛋白活性的分析，证明了嗜热脂肪芽孢杆菌T521菌株的6－磷酸葡萄糖异构酶同工酶基因pgiB上游含启动子样序列的4