【摘 要】
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为了了解猪瘟病毒(CSFV)在PK-15细胞上的增殖规律.根据GenBank中CSFV Shimen毒株的NS5A基因保守区域序列,设计1对特异性引物,以CSFV总RNA为反转录模板,经优化反应条件,建立了
【机 构】
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河南牧业经济学院动物医药学院,河南郑州450046河南省农业科学院动物免疫学实验室,河南郑州450002;河南省农业科学院动物免疫学实验室,河南郑州,450002;河南牧业经济学院动物医药学院,河南郑
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为了了解猪瘟病毒(CSFV)在PK-15细胞上的增殖规律.根据GenBank中CSFV Shimen毒株的NS5A基因保守区域序列,设计1对特异性引物,以CSFV总RNA为反转录模板,经优化反应条件,建立了基于实时荧光定量PCR技术的CSFV检测方法,并对其进行了敏感性、特异性、重复性试验,结果显示,该方法重复性好、特异性强,最低检测模板浓度为10拷贝/μL,并且CSFV的最低检测限为1TCID50/mL.利用所建立的方法研究CSFV在PK-15细胞上清中的增殖动态,并与TCID5o方法绘制的复制动态曲线进行比较.结果 显示,两种方法测定的CSFV在PK-15细胞上的复制动态具有一定的平行关系,该方法为研究猪瘟病毒的致病机理及利用体外细胞培养毒生产疫苗提供了试验依据.
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