【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本(LncRNA ZFAS)1通过靶基因微小RNA-432-5p(miR-432-5p)调控肺癌细胞增殖和侵袭迁移的分子机制.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测不同肺癌细胞中Ln-cRNA ZFAS1、miR-432-5p的表达情况.双荧光素酶报告基因检测ZFAS1与miR-432-5p的相互作用.MTT实验检测抑制ZFAS1及miR-432-5p过表达后肺癌A549细胞增殖能力变化及抑制miR-432-5p的表达后肺癌A549细胞增殖能力的
【机 构】
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武汉市金银潭医院内科,湖北 武汉 430023;武汉市蔡甸中医院
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目的 探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本(LncRNA ZFAS)1通过靶基因微小RNA-432-5p(miR-432-5p)调控肺癌细胞增殖和侵袭迁移的分子机制.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测不同肺癌细胞中Ln-cRNA ZFAS1、miR-432-5p的表达情况.双荧光素酶报告基因检测ZFAS1与miR-432-5p的相互作用.MTT实验检测抑制ZFAS1及miR-432-5p过表达后肺癌A549细胞增殖能力变化及抑制miR-432-5p的表达后肺癌A549细胞增殖能力的恢复情况.Transwell迁移及侵袭实验检测抑制ZFAS1及miR-432-5p过表达后A549细胞迁移及侵袭能力的变化及抑制miR-432-5p的表达后A549细胞迁移及侵袭能力的恢复情况.Western印迹实验检测细胞增殖、迁移及侵袭相关蛋白表达.结果 与BE-AS-2B细胞相比,不同肺癌细胞中ZFAS1表达水平明显升高,而miR-432-5p表达水平明显降低;双荧光素酶实验证实ZFAS1可调控miR-432-5p的表达与活性;抑制ZFAS1或上调miR-432-5p的表达后可降低A549细胞增殖、迁移及侵袭能力,CyclinE、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均明显降低;抑制miR-432-5p的表达后A549细胞增殖、迁移及侵袭能力相对增强.结论 ZFAS1可调控靶基因miR-432-5p的表达影响肺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力.
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