【摘 要】
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采自上海郊县某发病鸡场的法氏囊病料,用单克隆抗体(McAb)沉淀法从冻融的上清液提纯IBD病毒.用SDS-蛋白酶K法提纯核酸,得到高纯度的IBDV RNA后,再用特异性引物进行逆转录和PC
【机 构】
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上海交通大学农学院生物技术研究所,
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采自上海郊县某发病鸡场的法氏囊病料,用单克隆抗体(McAb)沉淀法从冻融的上清液提纯IBD病毒.用SDS-蛋白酶K法提纯核酸,得到高纯度的IBDV RNA后,再用特异性引物进行逆转录和PCR扩增,得到长度为147bp的IBDV cDNA片段.将该片段回收、纯化和克隆,经测序鉴定,其结果与Genebank中同源率达96%.采用DIG非放射性标记系统,标记IBDV cDNA片段,得到足够量的探针,与不同毒株的IBDV RNA和送检病料RNA进行杂交,均有清晰斑点出现,其灵敏度为0.1pg.
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