【摘 要】
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目的 研究靶向封闭端粒酶反转录酶(hTERT)mRNA的反义硫代寡核苷酸(ASPSODN)对K562细胞目的基因的抑制及其对端粒酶活性及细胞增殖周期和凋亡的影响.方法ASPSODN转染到人类红白血病细胞株K562,采用MTT法、酶联免疫吸附(ELISA)法和流式细胞术(FCM)检测K562细胞的增殖、端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期的改变,RT-PCR检测hTERTmRNA的表达.结果 0.6μmo
【机 构】
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116011,大连大学附属中山医院血液科,大连医科大学附属第一医院血液科,大连医科大学附属第一医院血液科
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目的 研究靶向封闭端粒酶反转录酶(hTERT)mRNA的反义硫代寡核苷酸(ASPSODN)对K562细胞目的基因的抑制及其对端粒酶活性及细胞增殖周期和凋亡的影响.方法ASPSODN转染到人类红白血病细胞株K562,采用MTT法、酶联免疫吸附(ELISA)法和流式细胞术(FCM)检测K562细胞的增殖、端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期的改变,RT-PCR检测hTERTmRNA的表达.结果 0.6μmol/L的ASPSODN(0.42±0.16)能明显下调hTERT表达(P<0.05),端粒酶相对活性降至52%;MTT法检测显示明显抑制K562细胞增殖活性;FCM显示细胞凋亡率为10.31%,PI染色显示细胞被阻止在G_1/G_0期,S期及G_2/M期的细胞减少,但无特征性的凋亡峰.结论ASPSODN靶向hTERT能特异性抑制K562细胞hTERT mRNA的表达,明显下调端粒酶活性,抑制K562细胞增殖,并通过降低细胞的端粒酶活性而诱发细胞凋亡。
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