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摘要：目的：确定伤科跌打片的提取工艺。
方法：采取正交实验方法，以柴胡皂苷a为考察指标进行研究，最终产品的提取工艺。
结果：提取工艺为：取处方药材加12倍量水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏，即得。
结论：该提取工艺科学可靠，稳定性好，适合工业生产。
关键词：伤科跌打片 提取工艺 试验研究
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.542
【中图分类号】R9 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）08-0466-02
伤科跌打片主要由三七、大黄、木香等中药组成。具活血散瘀，消肿止痛。用于跌打损伤、伤筋动骨、瘀血肿痛、闪腰岔气。[1]为了更好的控制产品的提取工艺，现对伤科跌打片提取工艺进行研究。
1 材料与仪器
制川乌、三棱（制）、莪术（制）、香附（醋制）、当归、续断、牡丹皮、蒲黄、防风、五灵脂（制）、红花、乌药、柴胡、地黄（购自安徽省亳州市药材总公司），柴胡皂苷a对照品（中国药品生物制品检定所，含量测定用，编号765-200104），所用试剂均为分析纯。
HPLC（岛津公司）；C18柱（250mm×4.6mm）。柴胡皂苷α对照品购自自中国药品生物制品检定所，甲醇为色谱醇；其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 正交试验因素水平的选择。
2.2 样品提取。称取制川乌15g、三棱（制）15g、莪术（制）15g、香附（醋制）15g、当归15g、续断15g、牡丹皮15g、蒲黄15g、防风15g、五灵脂（制）15g、红花15g、乌药11.25g、柴胡11.25g、地黄22.5g，共计210g，计9份，按L9（34）正交试验设计表格，加水煎煮，滤过，合并滤液，浓缩至适量，加水定容至1000ml，即得。
2.3 样品测定。
2.3.1 供试品溶液制备。精密吸取样品液25ml，置分液漏斗中，加石油醚（75℃）和醋酸乙酯各振摇提取3次，每次30ml，弃去石油醚层和醋酸乙酯层，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次30ml，弃去洗液，分取正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加甲醇使溶解，并定量转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.3.2 对照品溶液制备。精密称取柴胡皂苷a对照品适量，加甲醇制成每1ml含柴胡皂苷a 45ug作为对照品溶液。
2.3.3 色谱条件。以乙腈-水（40∶60）为流动相，C18色谱柱250mm×4.6mm，5um，柱温：35℃，检测波长为210nm，流速1.0ml/min。
2.3.4 测定法。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20ul注入液相色谱仪测定，计算柴胡皂苷a的含量。结果见下表2。
2.4 结果分析。根据方差分析和极差分析的结果，各因素影响程度依次为B>C>A，因此优选出理论最佳条件为A3B3C3，因素C无显著性影响，且水平2和水平3之间的差距较小，并考虑缩短生产流程、降低成本的因素，将提取次数定为二次，即将处方药材加12倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，测定柴胡皂苷a的煎出量，并进行三批验证，其验证试验及结果如下表4。
上述试验结果表明，验证结果与正交试验结果基本一致，故提取工艺为：取处方药材加12倍量水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏，即得。该提取工艺科学可靠，稳定性好，适合工业生产。
参考文献
[1] 文秀云.伤科跌打片薄层色谱鉴别研究.《医学信息（中旬刊）》.2011年08期
[2] 黄帅，马淼，黄倩倩，符颖，魏建和，潘瑞乐.一测多评法同步测定柴胡药材中3种皂苷的含量，时珍国医国药，2010.04第72-74页
方法：采取正交实验方法，以柴胡皂苷a为考察指标进行研究，最终产品的提取工艺。
结果：提取工艺为：取处方药材加12倍量水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏，即得。
结论：该提取工艺科学可靠，稳定性好，适合工业生产。
关键词：伤科跌打片 提取工艺 试验研究
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.542
【中图分类号】R9 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）08-0466-02
伤科跌打片主要由三七、大黄、木香等中药组成。具活血散瘀，消肿止痛。用于跌打损伤、伤筋动骨、瘀血肿痛、闪腰岔气。[1]为了更好的控制产品的提取工艺，现对伤科跌打片提取工艺进行研究。
1 材料与仪器
制川乌、三棱（制）、莪术（制）、香附（醋制）、当归、续断、牡丹皮、蒲黄、防风、五灵脂（制）、红花、乌药、柴胡、地黄（购自安徽省亳州市药材总公司），柴胡皂苷a对照品（中国药品生物制品检定所，含量测定用，编号765-200104），所用试剂均为分析纯。
HPLC（岛津公司）；C18柱（250mm×4.6mm）。柴胡皂苷α对照品购自自中国药品生物制品检定所，甲醇为色谱醇；其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 正交试验因素水平的选择。
2.2 样品提取。称取制川乌15g、三棱（制）15g、莪术（制）15g、香附（醋制）15g、当归15g、续断15g、牡丹皮15g、蒲黄15g、防风15g、五灵脂（制）15g、红花15g、乌药11.25g、柴胡11.25g、地黄22.5g，共计210g，计9份，按L9（34）正交试验设计表格，加水煎煮，滤过，合并滤液，浓缩至适量，加水定容至1000ml，即得。
2.3 样品测定。
2.3.1 供试品溶液制备。精密吸取样品液25ml，置分液漏斗中，加石油醚（75℃）和醋酸乙酯各振摇提取3次，每次30ml，弃去石油醚层和醋酸乙酯层，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的氨试液洗涤2次，每次30ml，弃去洗液，分取正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加甲醇使溶解，并定量转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.3.2 对照品溶液制备。精密称取柴胡皂苷a对照品适量，加甲醇制成每1ml含柴胡皂苷a 45ug作为对照品溶液。
2.3.3 色谱条件。以乙腈-水（40∶60）为流动相，C18色谱柱250mm×4.6mm，5um，柱温：35℃，检测波长为210nm，流速1.0ml/min。
2.3.4 测定法。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20ul注入液相色谱仪测定，计算柴胡皂苷a的含量。结果见下表2。
2.4 结果分析。根据方差分析和极差分析的结果，各因素影响程度依次为B>C>A，因此优选出理论最佳条件为A3B3C3，因素C无显著性影响，且水平2和水平3之间的差距较小，并考虑缩短生产流程、降低成本的因素，将提取次数定为二次，即将处方药材加12倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，测定柴胡皂苷a的煎出量，并进行三批验证，其验证试验及结果如下表4。
上述试验结果表明，验证结果与正交试验结果基本一致，故提取工艺为：取处方药材加12倍量水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成膏，即得。该提取工艺科学可靠，稳定性好，适合工业生产。
参考文献
[1] 文秀云.伤科跌打片薄层色谱鉴别研究.《医学信息（中旬刊）》.2011年08期
[2] 黄帅，马淼，黄倩倩，符颖，魏建和，潘瑞乐.一测多评法同步测定柴胡药材中3种皂苷的含量，时珍国医国药，2010.04第72-74页