观察转化生长因子-β1(TGF-β1)在肝癌细胞对Wnt信号通路的调节作用。
方法对肝癌细胞株HepG2细胞使用5、10、20 μg/L TGF-β1重组蛋白诱导，48 h后细胞计数检测肝癌细胞增殖。蛋白质印迹法(Western blot)方法检测上述各组上皮-间充质转化(EMT)标志蛋白及Wnt通路中相关蛋白表达。对肝癌细胞进行β-连环蛋白(β-catenin)小干扰RNA(siRNA)沉默，及β-catenin siRNA沉默加TGF-β1重组蛋白诱导，分别检测EMT标志蛋白及Wnt通路中相关蛋白表达，并进行对比分析。实验数据以SPSS 18.0软件进行统计分析，实验图片采用Image J软件进行灰度分析，目的蛋白相对表达量以目的蛋白/内参蛋白的比值表示。
结果TGF-β1可促进肝癌细胞体外增殖，且与TGF-β1处理浓度呈明显相关(5 μg/L实验组P<0.01，10 μg/L实验组P<0.01，20 μg/L实验组P<0.01)。TGF-β1处理组的肝癌细胞上皮细胞标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达下调；间质标志蛋白波形蛋白(Vimentin)和β-catenin表达上调，且与TGF-β1处理浓度呈明显相关(E-cadherin对照组：1.000±0.058；5 μg/L实验组：0.937±0.049，P>0.05；10 μg/L实验组：0.490±0.046，P<0.01；20 μg/L实验组：0.520±0.035，P<0.01。Vimentin对照组：1.000±0.058；5 μg/L实验组：1.097±0.042，P>0.05；10 μg/L实验组：2.217±0.169，P<0.01；20 μg/L实验组：2.467±0.088，P<0.01。β-catenin对照组：1.000±0.115；5 μg/L实验组：1.893±0.116，P<0.01；10 μg/L实验组：2.327±0.104，P<0.01；20 μg/L实验组：2.633±0.078，P<0.01)。β-catenin沉默组上皮标志物E-cadherin的表达上调，间质标志物Vimentin和β-catenin表达下调；而加入TGF-β1可以使β-catenin沉默的肝癌细胞中的E-cadherin的表达降低且Vimentin和β-catenin表达上调(E-cadherin对照组：1.000±0.068；β-catenin siRNA沉默组：2.420±0.095，P<0.01；β-catenin siRNA沉默＋ TGF-β1组：1.187±0.038，P<0.01。Vimentin对照组：1.000±0.113；β-catenin siRNA沉默组：0.450±0.052，P<0.01；β-catenin siRNA沉默＋TGF-β1组：1.353±0.088，P<0.01。β-catenin对照组：1.000±0.058；β-catenin siRNA沉默组：0.597±0.038，P<0.01；β-catenin siRNA沉默＋TGF-β1组：0.917±0.033，P<0.01)。
结论TGF-β1可促进肝癌细胞体外增殖，且与TGF-β1处理浓度呈明显相关。TGF-β1可诱导肝癌细胞发生EMT样改变，且与TGF-β1处理浓度呈明显相关。TGF-β1可通过Wnt信号通路诱导肝癌细胞发生EMT过程。