【摘 要】
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目的 建立快速测定人血清中非衍生化的20种氨基酸的超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)分析方法,并用于检测重症肺炎患者血清氨基酸变化.方法 用Acquity BEH Amid
【机 构】
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首都医科大学 附属北京世纪坛医院药剂科,北京100038;首都医科大学 附属北京世纪坛医院临床合理用药生物特征谱学评价北京市重点实验室,北京100038;首都医科大学 附属北京世纪坛医院临床合理用药生
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目的 建立快速测定人血清中非衍生化的20种氨基酸的超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)分析方法,并用于检测重症肺炎患者血清氨基酸变化.方法 用Acquity BEH Amide 色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),以稳定同位素标记的氨基酸作为内标,流动相为乙腈-水-20 mmol·L-1乙酸铵-0.5％甲酸溶液,梯度洗脱.选择重症肺炎者16例与健康者14例进行检测.结果 在所设定的色谱条件下,基质效应不影响测定结果,各氨基酸在标准曲线范围内线性关系良好,相关系数均r2 ＞0.99.准确度、批内和批间精密度均RSD＜15％,在测定过程中稳定性符合要求.重症肺炎组与健康组相比,谷氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、丝氨酸和组氨酸水平显著升高,谷氨酰胺、苏氨酸和赖氨酸水平显著降低,其中这 2 组的谷氨酸含量分别为(177.49 ± 65.38)和(77.43 ± 31.83)μmol·L-1;这2 组的谷氨酰胺含量分别为(222.49 ± 100.36)和(896.09 ± 173.93)μmol·L-1,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 该方法可用于重症肺炎患者血清中氨基酸的含量测定.
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