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目的
通过构建大鼠乳鼠神经元原代细胞培养模型,探讨三氧化二砷(As2O3)对神经元迁移的影响及其机制。
方法取SD大鼠新生乳鼠脑组织进行皮质神经元原代培养,建立细胞培养模型。实验分为4组:正常对照组、 1 μmol/L As2O3组、10 μmol/L As2O3组和20 μmol/L As2O3组。加入不同浓度As2O3培养24 h,采用Boyden趋化小室检测各组神经元的迁移情况,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察肌动蛋白的结构。
结果正常对照组神经元分布规律;1 μmol/L As2O3组、10 μmol/L As2O3组和20 μmol/L As2O3组神经元生长稀疏,杂乱分布,其中20 μmol/L As2O3组最为明显。正常对照组、1 μmol/L As2O3组、10 μmol/L As2O3组和20 μmol/L AS2O3组神经元在相同单位时间内迁移的平均细胞数分别为64.6±4.3、63.0±7.0、54.8±3.6、21.6±3.9。组间比较差异有统计学意义(F=49.31,P<0.01)。共聚焦显微镜下观察到正常对照组和1 μmol/L As2O3组神经元内的肌动蛋白呈纤维状条带分布,10 μmol/L As2O3组和20 μmol/L As2O3组神经元肌动蛋白断裂、散在分布。
结论As2O3可以干扰神经元的迁移,与As2O3的浓度有关,肌动蛋白的结构破坏可能是其潜在机制。