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目的 构建靶向白血病干细胞CD123的融合蛋白,检测其表达效果及其识别白血病干细胞的活性.方法 采用PCR法扩增白细胞介素-3(IL-3)和毒素蛋白(LP)的编码DNA序列,经酶切、连接,克隆至表达载体pAYZ,转化大肠杆菌E.coli 16C9,鉴定阳性克隆菌落,经低磷培养基AP5诱导表达融合蛋白IL-3-G4S-LP,用CM-FF阳离子柱和抗-Etag亲和层析柱纯化,纯化产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定,流式细胞术测定其与红白血病细胞TF1的结合活性.结果 构建的融合蛋白在大肠杆菌中以可溶性蛋白表达,纯化后纯度达95%以上,表达量约为1 mg/L,并有与白血病干细胞表面IL-3受体α亚基(CD123)特异性结合的活性.结论 构建的融合蛋白IL-3-G4S-LP具有与白血病干细胞结合的特性,可望成为复发和耐药白血病的治疗药物。