【摘 要】
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目的 观察miR-93对常用于心脏发育研究的睾丸畸胎瘤细胞P19增殖与心肌分化的影响,并分析其与活化T细胞核转录因子3(NFATC3)在此过程中的调控关系.方法 将P19细胞分为三组,miR-93组、NC组分别转染miR-93 mimic及阴性对照空白质粒,对照组不转染;采用CCK-8法观察转染0、24、48 h后miR-93对P19细胞增殖的影响,Western blotting法检测miR-93对心肌分化标志基因心肌肌钙蛋白T(cTnT)与锌指转录因子CATA结合蛋白4(GATA4)的影响.通过Tar
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院小儿心胸外科,南京210009;南京医科大学第一附属医院儿童保健科
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目的 观察miR-93对常用于心脏发育研究的睾丸畸胎瘤细胞P19增殖与心肌分化的影响,并分析其与活化T细胞核转录因子3(NFATC3)在此过程中的调控关系.方法 将P19细胞分为三组,miR-93组、NC组分别转染miR-93 mimic及阴性对照空白质粒,对照组不转染;采用CCK-8法观察转染0、24、48 h后miR-93对P19细胞增殖的影响,Western blotting法检测miR-93对心肌分化标志基因心肌肌钙蛋白T(cTnT)与锌指转录因子CATA结合蛋白4(GATA4)的影响.通过TargetScanhuman7.2数据库筛选发现NFATC3为miR-93的下游靶基因,通过双荧光素酶基因报告验证两者的结合情况;采用Western blotting法检测miR-93对P19细胞中NFATC3表达的影响.再将P19细胞另分为三组,miR-93组、miR-93+NFATC3组及NC组分别转染miR-93 mimic、miR-93 mimic+NFATC3 mimic及阴性对照空白质粒,采用CCK-8法、Western blotting法观察NFATC3对miR-93过表达所致细胞增殖及心肌分化的影响.结果 miR-93组除0h外同时点细胞OD值及cTnT、GATA4蛋白表达均低于NC组及对照组(P均<0.05),NC组与对照组各指标比较差异无统计学意义.转染NFATC3 wt+NC质粒的P19细胞荧光素酶相对活性与转染NFATC3 wt+miR-93 mimic质粒的细胞比较有明显差异(P<0.01);转染NFATC3 mut+NC质粒的P19细胞荧光素酶相对活性与转染NFATC3 mut+miR-93 mimic质粒的细胞比较无统计学差异.miR-93组NFATC3蛋白表达低于对照组及NC组(P均<0.05),除0h外同时点细胞OD值及cTnT、GATA4蛋白表达NC组>miR-93+NFATC3组>miR-93组(P均<0.05).结论 miR-93可抑制P19细胞增殖及心肌分化,该作用可能通过沉默NFATC3表达来实现,或可为先天性心脏病提供潜在的治疗靶点.
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目的 探索与精神分裂症相关的QTc延长危险因素,验证危险因素的交互作用,建立精神分裂症患者QTc延长的预测模型.方法 选取341例精神分裂症患者基线期资料进行单因素分析及多因素Cox回归分析,基于多因素Cox回归结果预测精神分裂症患者1年QTc延长风险.结果 341例患者中有44例患者发生QTc延长,发生率为12.90%.QTc延长的患者中应用高危药物的人数比例高于QTc正常患者(P<0.05).多因素Cox回归结果提示性别及代谢综合征之间存在交互作用(P<0.05).单因素分析结果显示女性QTc延长患者
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