【摘 要】
:
目的 研究脱氢表雄酮(DHEA)对不同周龄C57BL/6J雌鼠超排卵效果和卵母细胞质量影响及其机制.方法 4周龄、5周龄、6周龄、7周龄的C57BL/6J雌鼠每周龄各24只,随机分为对照组、低剂量处理组(2mg/kg/d)和高剂量处理组(5mg/kg/d).超排卵前用DHEA给予灌胃1周,进行体外受精,收集卵丘细胞和卵巢组织.提取7周龄C57BL/6J对照组以及实验组卵丘细胞mRNA进行qRT-PCR检测胚胎质量相关基因Has2、Ptgs2和Vcan的mRNA水平以及凋亡相关基因Caspase3和Bcl2
【机 构】
:
中国医科大学实验动物部,辽宁沈阳,110122
论文部分内容阅读
目的 研究脱氢表雄酮(DHEA)对不同周龄C57BL/6J雌鼠超排卵效果和卵母细胞质量影响及其机制.方法 4周龄、5周龄、6周龄、7周龄的C57BL/6J雌鼠每周龄各24只,随机分为对照组、低剂量处理组(2mg/kg/d)和高剂量处理组(5mg/kg/d).超排卵前用DHEA给予灌胃1周,进行体外受精,收集卵丘细胞和卵巢组织.提取7周龄C57BL/6J对照组以及实验组卵丘细胞mRNA进行qRT-PCR检测胚胎质量相关基因Has2、Ptgs2和Vcan的mRNA水平以及凋亡相关基因Caspase3和Bcl2l10的mRNA水平.提取7周龄C57BL/6J对照组以及实验组卵巢组织mRNA检测Gdf9、Bmp15h和Fshr的mRNA表达水平.结果 经过DHEA处理的雌鼠超排卵后,4周龄、5周龄、6周龄、7周龄的C57BL/6J雌鼠体外受精(IVF)显示实验组异型卵比例下降,7周龄的C57BL/6J雌鼠受精率升高.7周龄C57BL/6J实验组卵丘细胞中与胚胎质量相关基因Has2,Ptsg2和Vcan转录水平与对照组相比上调,Caspase-3的mRNA水平下调,Bcl2l10mRNA水平上调.7周龄C57BL/6J卵巢组织中Gdf9和Bmp15mRNA水平上调.结论 DHEA处理7周龄C57BL/6J后经激素超排,通过抑制卵丘细胞凋亡,提高卵母细胞的质量,提高超排卵效果.
其他文献
卷曲螺旋结构域(CCDC)家族蛋白具有重要生物学功能,其多个家族成员参与调控恶性肿瘤细胞的侵袭和转移等多种生物学行为.目前已证实CCDC33、CCDC34、CCDC67和CCDC88A蛋白的表达异常及其相关通路的改变能明显影响肺癌、膀胱癌、甲状腺癌及胰腺癌的恶性进展,这为新型医药应用于肿瘤靶向治疗提供了理论依据.
目的 观察橙皮素对结肠癌HCT116细胞凋亡、迁移与侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 采用不同浓度的橙皮素(100、200、400、600、800 μ M)处理结肠癌HCT116细胞和正常结肠上皮NCM460细胞,作用24、48h后,CCK-8检测细胞增殖.选取200μM和400μM橙皮素处理HCT116细胞24h后,采用AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved
目的 评价沉默MTA1基因对神经胶质瘤细胞U-87-MG侵袭与迁移能力的影响.方法 应用慢病毒转染技术沉默MTA1基因的表达,通过Western blot实验与荧光共聚焦实验检测MTA1蛋白与F-actin蛋白的表达;通过Transwell实验评估细胞侵袭与迁移能力;Western blot实验检测E-cadherin,N-cadherin蛋白的表达.结果 沉默MTA1基因可下调F-actin蛋白的表达水平,抑制U-87-MG细胞的侵袭与迁移能力,并且上调N-cadherin蛋白,下调E-cadherin
目的 探讨奥沙利铂对结肠癌细胞SW480细胞的增殖、凋亡及迁移作用的影响..方法 体外培养结肠癌SW480细胞,加入不同浓度的奥沙利铂(5,10,20,40μg/mL),分别培养0,24,48,72h后,平板克隆形成实验检测奥沙利铂对结肠癌SW480细胞生长能力的影响;细胞划痕实验观察实验处理前后SW480细胞的迁移能力的变化;Matrigel细胞侵袭实验检测奥沙利铂对恶性肿瘤细胞侵袭和转移的影响;Real-time PCR和Western blot验证Bcl2、Bax、Bcl-Ⅺ、E-Cadherin等
目的 探讨晚期糖基化终产物受体(RAGE)对脊髓损伤(SCI)大鼠的神经保护作用及可能的分子机制.方法 成年雄性SD大鼠120只按照随机数表法分为假手术组(Sham组,40只)、脊髓损伤组(SCI组,40只)、RAGE中和抗体组(anti-RAGE组,40只),造模成功后,anti-RAGE组小鼠进行腹腔注射RAGE中和抗体,Sham组和SCI组予以腹腔注射等体积的生理盐水.术后1周,Western blot和免疫荧光染色检测神经干细胞标记蛋白nestin与凋亡蛋白caspase-3、caspase-9的
胃癌宫颈转移十分罕见,我院于2005年10月收治以宫颈转移为首诊胃癌1例,现报告如下。1病例报告患者女,57岁,因阴道不规则流血1个月余来我院就诊。子宫颈检查见三个直径为0.5~1
目的 探讨miR-187对胶质瘤U251细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响及其机制.方法 将体外培养的U251细胞分为Con组(未处理)、NC组(转染miR-NC)、miR-187组(转染miR-187 mimics).采用实时定量PCR检测miR-187的表达,MTT法、Transwell小室实验和流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡,实时定量PCR和Western blot检测S100A4 mRNA和蛋白的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-187和S100A4的靶向关系.结果 与Con组相
目的 探讨白藜芦醇(resveratrol,RSV)对多发性硬化(MS)大鼠神经系统保护作用与Wnt/β-catenin信号通路的相关性.方法 将60只6周龄的SD雌性大鼠随机分为四组,对照组(给予等体积的生理盐水灌胃)、MS模型组(足跖皮下注射抗原乳剂豚鼠脊髓匀浆抗原与福氏佐剂)、MS+RSV低剂量干预组(5mg/kg RSV灌胃)、MS+RSV高剂量干预组(50mg/kg的RSV灌胃),观察大鼠临床发病、体重变化与神经功能评分情况,HE染色观察大鼠脊髓组织病变,TUNEL法观察神经细胞凋亡,Weste
ω-3脂肪酸(ω-3 polyunsaturated fatty acids,ω-3PUFAs)是一种多不饱和脂肪酸,它的第一个双碳键位于酰基链甲基末端的第三个原子上,因此命名为ω-3.这类脂肪酸的代表有α亚麻酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA).ω-3PUFAs对心血管有保护作用,有提高细胞膜流动性、调节细胞膜离子通道、抑制血小板聚集、下调炎症因子、抗氧化等多种生理功能,临床上对于调节血压、血脂、心律、改善内皮功能和抗心肌纤维化都有重要的作用.本文通过阐述ω-3PUFAs的结构
目的 探讨石蒜碱对人肺癌NCI-H460细胞增殖和凋亡的影响.方法 人肺癌NCI-H460细胞株于DMEM培养基进行培养,采用1.25、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L的石蒜碱对其进行处理,并以0.9%NaCl溶液为对照组.倒置显微镜下观察NCI-H460细胞形态变化,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测细胞凋亡相关基因p53、Bcl-2、Bax、Caspase-2、Caspase-3的蛋白表达水平.结果 经石蒜碱处理后,NCI-H460细胞外形