【摘 要】
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目的 比较蛋白质组,分析羟基喜树碱诱导肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡前后的线粒体蛋白质表达谱.方法 用羟基喜树碱诱导肝癌SMMC-7721细胞发生线粒体跨膜电位耗散,提取线粒体
【机 构】
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重庆医科大学检验系、临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,潍坊医学院临床学院检验系
【基金项目】
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国家自然科学基金;高等学校博士学科点专项科研项目
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目的 比较蛋白质组,分析羟基喜树碱诱导肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡前后的线粒体蛋白质表达谱.方法 用羟基喜树碱诱导肝癌SMMC-7721细胞发生线粒体跨膜电位耗散,提取线粒体并用Western blot法对线粒体纯度进行鉴定;用二维凝胶电泳分离溶解度不同的3种蛋白质组分并对蛋白质进行银染色;利用PDQuest图像分析软件分析比较凝胶结果,获得差异蛋白质;采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定部分差异蛋白质,并用Western blot法对部分差异蛋白质进行进一步的鉴定.结果 羟基喜树碱成功地诱导线粒体发生跨膜电位耗散,并获得纯度很高的线粒体;通过PDQuest图像分析软件发现,线粒体发生跨膜电位耗散前后比较约有39个蛋白质点表达有差异;对其中28个差异蛋白质斑点进行了肽质指纹图分析,鉴定出20种可能的蛋白质.结论 获得了羟基喜树碱诱导线粒体凋亡前后差异蛋白的相关信息,为从蛋白质水平进一步研究羟基喜树碱诱导癌细胞发生凋亡的机制奠定了基础.
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