草鱼呼肠孤病毒衣壳蛋白VP7真核重组质粒的构建及免疫效果评价

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为研究开发草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)基因疫苗,以编码其主要衣壳蛋白VP7的序列为靶基因,克隆构建了真核表达重组质粒p EGFP-N1-VP7。用脂质体法将其转染真核细胞COS-1和CIK进行瞬时表达,荧光显微镜观察及特异性RT-PCR检测结果表明,成功转染并得到了高效表达。大量扩增重组菌,提取并制备重组质粒p EGFP-N1-VP7,肌肉注射免疫(20±5)g的健康草鱼,重组质粒按0.5和5μg分为2组,同时设5μg空载体组及对照组。免疫草鱼22d后,检测
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