【摘 要】
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目的 探究羟基红花黄色素A（HSYA）对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制。方法 体外培养成纤维样滑膜细胞MH7A,分为对照组、TNF-α组、不同剂量（0.1、1.0、10μmol/L）HSYA+TNF-α组、miR-NC+TNF-α组、miR-20a-5p+TNF-α组、anti-miR-NC+10μmol/L HSYA+TNF-α组、anti-miR-20a-5p
【机 构】
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四川省广安市人民医院(四川大学华西医院广安医院)风湿免疫科
【基金项目】
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四川省卫生和计划生育委员会科研课题（编号：18PJ108）；
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目的 探究羟基红花黄色素A（HSYA）对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制。方法 体外培养成纤维样滑膜细胞MH7A,分为对照组、TNF-α组、不同剂量（0.1、1.0、10μmol/L）HSYA+TNF-α组、miR-NC+TNF-α组、miR-20a-5p+TNF-α组、anti-miR-NC+10μmol/L HSYA+TNF-α组、anti-miR-20a-5p+10μmol/L HSYA+TNF-α组，CCK-8法检测细胞增殖活性，流式细胞术检测细胞凋亡，酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中IL-1β和IL-6表达，RT-qPCR法检测细胞中miR-20a-5p表达，蛋白质印迹法检测细胞中TLR4蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-20a-5p与TLR4调控关系。结果 与对照组比较，TNF-α组MH7A细胞增殖活性降低（P＜0.05）,细胞凋亡率及细胞培养上清液中IL-1β和IL-6表达水平升高（P＜0.05）,细胞中miR-20a-5p表达降低（P＜0.05）,而TLR4蛋白表达升高（P＜0.05）。与TNF-α组比较，不同剂量（0.1、1.0、10μmol/L）HSYA+TNF-α组MH7A细胞增殖活性升高（P＜0.05）,细胞凋亡率及细胞培养上清液中IL-1β和IL-6表达水平降低（P＜0.05）,细胞中miR-20a-5p表达升高（P＜0.05）,而TLR4蛋白表达降低（P＜0.05）。与miR-NC+TNF-α组比较，miR-20a-5p+TNF-α组MH7A细胞增殖活性升高（P＜0.05）,细胞凋亡率及细胞培养上清液中IL-1β和IL-6表达水平降低（P＜0.05）,细胞中TLR4蛋白表达降低（P＜0.05）。与anti-miR-NC+H-HSYA+TNF-α组比较，anti-miR-20a-5p+H-HSYA+TNF-α组MH7A细胞增殖活性降低（P＜0.05）,细胞凋亡率及细胞培养上清液中IL-1β和IL-6表达水平升高（P＜0.05）,细胞中TLR4蛋白表达升高（P＜0.05）。TLR4是miR-20a-5p的靶基因，且miR-20a-5p抑制MH7A细胞中TLR4蛋白表达（P＜0.05）。结论 HSYA对TNF-α诱导的成纤维样滑膜细胞MH7A凋亡和炎性因子表达具有抑制作用，其作用机制可能与调控miR-20a-5p/TLR4轴有关。
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