紫云英根瘤菌基因文库的构建及含完整结瘤基因的重组质粒pRaZ15...

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【摘要】

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以紫云英根瘤菌菌株7653R为材料,制备总DNA,经EcoRI限制酶部分酶解,通过10—50%蔗糖梯度离心,分离到20—30 kb的DNA片段。利用能在革兰氏阴性菌中转移和复制的广谱奇主载体—

【作者】

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张忠明陈华癸李阜棣范云六

【机构】

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华中农业大学生物固氮研究室,中国农业科学院分子生物学研究室

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

：

1991年3期

【关键词】

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紫云英根瘤菌基因文库结瘤基因 Rhizobium astragali nod genes gene library

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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以紫云英根瘤菌菌株7653R为材料,制备总DNA,经EcoRI限制酶部分酶解,通过10—50%蔗糖梯度离心,分离到20—30 kb的DNA片段。利用能在革兰氏阴性菌中转移和复制的广谱奇主载体——pLAFR1质粒,构建了紫云英根瘤菌基因文库。通过与苜蓿根瘤菌1021菌株中8.7kb的共同结瘤基因(作探针DNA)杂交,从基因文库中分离到紫云英根瘤菌共同结瘤基因片段。以紫云英根瘤菌不结瘤突变株7653R+1(7653R消除共生质粒)为受体、构建的7653R基因文库(E.coli C600)为供体,通过协助转移质

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