观察线粒体靶向多肽SS-31对小鼠急性后肢缺血/再灌注损伤的保护作用。
方法将60只C57BL/6小鼠随机分为5组(n=8):对照组(C组)、生理盐水预防组(S+IR组)、SS-31预防组(SS-31+IR组)、生理盐水治疗组(IR+S组)、SS-31治疗组(IR+SS-31组)。空白组小鼠仅麻醉处理,实验组小鼠进行左后肢缺血90 min以及再灌注8 h,预防组在缺血前30 min给药,治疗组在再灌注前30 min给药,取小鼠左后肢肌肉测定腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)、线粒体膜电位(MMP)、丙二醛(MDA)、细胞色素C(Cytochrome C)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、活化型半胱天冬酶3(Cleaved-Caspase 3)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(Catalase)活性和蛋白含量变化;观察小鼠左后肢肌肉组织的病理学变化。
结果再灌注8 h后SS-31两组与生理盐水两组比较,线粒体功能相关指标如MMP等显著升高(0.80±0.03、0.64±0.03比0.19±0.01、0.17±0.01,P预防=0.001,P治疗=0.003)。抗氧化相关指标如SOD酶活等明显升高[(49.13±0.94)、(41.98±1.20) U/mg比(25.88±1.11)、(25.52±1.51) U/mg,P预防=0.000,P治疗=0.001],MDA含量明显下降[(0.81±0.04)、(1.08±0.05) nm/mg比(2.06±0.04)、(1.98±0.06) nm/mg,P预防=0.000,P治疗=0.000],在Western blot结果中SS-31两组在TNF-α、IL-1β、胞质Cytochrome C及Cleaved-Caspase 3的蛋白表达量均小于生理盐水两组。
结论小鼠后肢缺血再灌注能引起肌肉的炎性反应、氧化应激及线粒体功能的损伤并诱导后肢骨骼肌细胞凋亡;线粒体靶向多肽SS-31的处理能够保护线粒体功能,抑制组织炎性反应及氧化应激,对小鼠后肢骨骼肌的缺血再灌注损伤有预防和治疗作用。