【摘 要】
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目的建立一种高效快速肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗CPS9V-CRM197的纯化方法。方法将9V型肺炎球菌多糖（CPS9V）与载体蛋白（CRM197）通过胺还原法进行偶连结合,制备成多糖蛋白结合物CPS9
【机 构】
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河北医科大学第四医院肿瘤内科; 河北佑仁生物科技有限公司;
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目的建立一种高效快速肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗CPS9V-CRM197的纯化方法。方法将9V型肺炎球菌多糖（CPS9V）与载体蛋白（CRM197）通过胺还原法进行偶连结合,制备成多糖蛋白结合物CPS9V-CRM197。通过超滤及阴离子层析两步法纯化后,经皮下免疫BALB/c小鼠,5μg/只,首次免疫后14d进行第2次免疫。于末次免疫后0、7、14、21d经颈动脉采血,分离血清,ELISA法检测血清中的IgG及IgM抗体滴度。结果纯化的CPS9V-CRM197结合物纯度达100%,多糖的总回收率为95%,分子半径为8.4nm,CL-4B色谱洗脱体积为50.32ml,酶解敏感性高于载体蛋白CRM197。末次免疫后7、14、21d时,CPS9V-CRM197免疫小鼠血清中IgG及IgM的滴度均明显高于CPS9V组（P<0.05）。结论本实验建立的肺炎多糖结合物两步纯化法具有高效、快速等优点,可用于进一步提高实际工业化生产中的生产效率。
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