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【摘要】 目的 了解浦北县2012年市售的婴幼儿配方食品污染状况，对婴幼儿配方食品中的阪歧肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌进行监测，为制定食源性疾病控制提供科学依据。方法 按2012年广西省食源性疾病监测计划要求，根据国家食品安全风险评估中心编写的《2012年食源性致病菌监测工作手册》对致病菌进行分离和鉴定。结果 2012年共监测不同品牌的婴幼儿食品20份，总检出率为50.0%（10/20）；其中阪歧肠杆菌15%（3/20）；蜡样芽胞杆菌35%（7/20）；金黄色葡萄球菌未检出。结论 经过监测调查，浦北县市售的婴幼儿配方食品中存在阪歧肠杆菌和蜡样芽胞杆菌污染。应加大对婴幼儿食品的监测，以防止食物中毒的发生。
【关键词】 浦北县；婴幼儿；配方食品；监测；调查
文章编号：1004-7484（2013）-10-5976-02
阪歧肠杆菌（Enterobacter sakazakii）属于肠杆菌科、肠杆菌属，是在人和动物肠道内寄生的一种革兰阴性无芽孢杆菌。该菌是肠道内正常菌群中的一种，在一定条件下可引起人和动物致病。阪歧肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症，并且可引起神经系统后遗症和死亡，死亡率高达50%。
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，简称金葡菌）为革兰氏阳性球菌，是引起细菌性食物中毒的重要病原菌之一，一旦感染，对全身各器官组织损伤严重，甚至危及生命。无论在发达国家还是在发展中国家，由金葡菌引起的食物中毒在细菌性食物中毒中占有较大比例。
蜡样芽胞杆菌是需氧性、有运动力、能产生芽胞的革兰氏阳性杆菌，在自然界分布较广，属条件致病菌中的一种，几乎所有种类的食品都曾被报道与蜡样芽胞杆菌引发的食物中毒有关。
为了解浦北县市售的婴幼儿配方食品中阪歧肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌污染状况，于2012年对浦北县两个超市和一个奶粉专卖店市售的婴幼儿配方食品进行了调查，现将检测结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 材料
1.1.1 样品来源 为浦北县两个超市和一个奶粉专卖店市售的婴幼儿配方食品，共采集20份，其中婴幼儿配方奶粉13份、谷物类辅助食品7份。
1.1.2 培养基及试剂 所有培养基均购自北京陆桥技术有限公司。生化鉴定试剂由法国生物梅里埃公司提供，以上试剂均经过质控并在有效期内使用，标准菌株均由广西壮族自治区疾病预防控制中心提供。
1.2 检测方法 按照国家食品安全风险评估中心编写的《2012年食源性致病菌监测工作手册》相关检测项目的方法进行。
1.2.1 阪崎肠杆菌定量（MPN法） 称取样品100，10，1g各3份，加入已预热至44℃分别盛有900，90，9mLBPW中，轻轻振摇使充分溶解，制成1∶10样品匀液，置36℃培养18h。分别移取1mL转种于10mLmLST-Vm肉汤，44℃培养24h。轻轻混匀mLST-Vm肉汤培养物各取1环分别划线接种于DFI显色琼脂平板，36℃培养24h。挑取1-5个可疑蓝绿色菌落，划线接种于TSA平板，25℃培养48h。从TSA平板上挑取可疑黄色菌落进行染色镜检、氧化酶试验等初步鉴定试验后进行确认试验，选用API鉴定系统ID32E试验条，将菌液加入试验条每一个小管，36℃培养24h，由ATB自动细菌鉴定仪读取。
1.2.2 金黄色葡萄球菌定量（MPN计数法） 称取25克样品加入225mL生理盐水，轻轻振摇使充分溶解，制成1∶10样品匀液，取上述1∶10的样品均液稀释成1∶100、1∶1000，选择这3个稀释度，每个稀释度各取1mL分别接种3管10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤管，36℃培养48h，转种Baird-Parker平板36℃培养48h，观察菌落形态特征，挑取菌落直径为2MM-3MM，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈的可疑菌落进行革兰氏染色镜检，转种血平板、BHI肉汤和营养琼脂斜面，36℃培养18h，进行血浆凝固酶试验。
1.2.3 蜡样芽胞杆菌定量（MPN计数法） 称取样品25g加入225mL生理盐水，制成1∶10样品匀液，取上述1∶10的样品均液稀释成1∶100、1∶1000，选择这3个稀释度，每个稀释度各取1mL分别接种3管10mL胰酪胨大豆多粘菌素肉汤中，30℃培养48h，用接种环从各管中分别移取一环，划线接种到MYP琼脂平板，30℃培养24h，从平板上挑取呈粉红色不透明、边缘不整齐、周围有淡红色沉淀环的可疑菌落进行染色镜检，并接种营养琼脂平板做纯培养，30℃培养24h，挑取纯培养物做生化鉴定确认。
2 结 果
2.1 阪崎肠杆菌检出情况 20份不同品牌的样品中，检出3份阪歧肠杆菌，检出率15%（3/20），其中7份婴幼儿谷物辅助食品中有3份检出阪歧肠杆菌，检出率42.9%（3/7），13份婴幼儿配方奶粉未检出阪歧肠杆菌。3份阪歧肠杆菌检出量分别是2.3、24、24MPN/100g。上述菌株经广西壮族自治区疾病预防控制中心确证实验，结果均符合阪歧肠杆菌生物学特性。3株阪歧肠杆菌生化鉴定结果，见表1。
2.2 金黄色葡萄球菌检出情况 20份不同品牌的样品中，7份婴幼儿谷物辅助食品和13份婴幼儿配方奶粉均未检出金黄色葡萄球菌。
2.3 蜡样芽胞杆菌检出情况 20份不同品牌的样品中，检出7份蜡样芽胞杆菌，检出率35%（7/20）。其中7份婴幼儿谷物辅助食品有3份检出蜡样芽胞杆菌，检出率42.9%（3/7）；13份婴幼儿配方奶粉有4份检出蜡样芽胞杆菌，检出率30.8%（4/13），其中2份羊奶中有1份检出蜡样芽胞杆菌，检出率50%（1/2），检出量在3.0-23MPN/g之间不等。上述菌株经广西壮族自治区疾病预防控制中心确证实验，结果均符合蜡样芽胞杆菌生物学特性，7株蜡样芽胞杆菌确证实验结果，见表2。
3 讨 论
这是首次在浦北县市售的婴幼儿谷物类辅助食品中检出阪歧肠杆菌、蜡样芽胞杆菌，配方奶粉只检出蜡样芽胞杆菌暂未检出阪歧肠杆菌和金黄色葡萄球菌，但不表示其无阪歧肠杆菌和金黄色葡萄球菌污染的风险，相对来说，婴幼儿谷物类辅助食品比奶粉污染还大。据了解，阪歧肠杆菌是一种“条件致病菌”，一旦在奶制品中出现，食用者可能会发生腹泻等症状。临床研究证明，阪歧肠杆菌的主要危害对象是早产儿等免疫力低下的新生儿，在少数情况下可能会引起新生儿脑膜炎或菌血症。目前，微生物学家尚不清楚阪歧肠杆菌的污染来源，但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。婴幼儿配方奶粉中阪歧肠杆菌的污染问题是近几年FAO/WHO关注的新焦点。
本次检出食品中污染的阪歧肠杆菌、蜡样芽胞杆菌的菌量都不是很少，对婴幼儿的安全有潜在的威胁。这3种菌在自然界分布广泛，可通过原料和添加剂的途径污染，也可于喂养婴幼儿前被污染。婴幼儿配方奶粉是新生儿重要的营养平衡和补充食品，其安全性直接关系新生儿的健康。
本次调查显示浦北县市售的婴幼儿配方食品存在着阪歧肠杆菌、蜡样芽胞杆菌的污染，对广大婴幼儿食品安全构成了威胁，应引起食品安全监督管理部门的重视，应加大对婴幼儿食品的监测调查，保障婴幼儿的健康。
参考文献
[1] GB/T4789.14-2003 食品卫生微生物学检验.蜡样芽胞杆菌检验[S].
[2] GB4789.10-2010 食品微生物学检验.金黄色葡萄球菌检验[S].
[3] GB4789.40-2010 食品微生物学检验.阪崎肠杆菌检验[S].
[4] 王芳，王金玲，贾琳，等.奶粉中阪歧肠杆菌的分离与鉴定[J].中国食品卫生杂志，2007，19（1）：52-53.
[5] 广州市售国产婴幼儿配方粉中阪歧肠杆菌污染调查[J].中国卫生检验杂志，2010，（01）.
【关键词】 浦北县；婴幼儿；配方食品；监测；调查
文章编号：1004-7484（2013）-10-5976-02
阪歧肠杆菌（Enterobacter sakazakii）属于肠杆菌科、肠杆菌属，是在人和动物肠道内寄生的一种革兰阴性无芽孢杆菌。该菌是肠道内正常菌群中的一种，在一定条件下可引起人和动物致病。阪歧肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症，并且可引起神经系统后遗症和死亡，死亡率高达50%。
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，简称金葡菌）为革兰氏阳性球菌，是引起细菌性食物中毒的重要病原菌之一，一旦感染，对全身各器官组织损伤严重，甚至危及生命。无论在发达国家还是在发展中国家，由金葡菌引起的食物中毒在细菌性食物中毒中占有较大比例。
蜡样芽胞杆菌是需氧性、有运动力、能产生芽胞的革兰氏阳性杆菌，在自然界分布较广，属条件致病菌中的一种，几乎所有种类的食品都曾被报道与蜡样芽胞杆菌引发的食物中毒有关。
为了解浦北县市售的婴幼儿配方食品中阪歧肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌污染状况，于2012年对浦北县两个超市和一个奶粉专卖店市售的婴幼儿配方食品进行了调查，现将检测结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 材料
1.1.1 样品来源 为浦北县两个超市和一个奶粉专卖店市售的婴幼儿配方食品，共采集20份，其中婴幼儿配方奶粉13份、谷物类辅助食品7份。
1.1.2 培养基及试剂 所有培养基均购自北京陆桥技术有限公司。生化鉴定试剂由法国生物梅里埃公司提供，以上试剂均经过质控并在有效期内使用，标准菌株均由广西壮族自治区疾病预防控制中心提供。
1.2 检测方法 按照国家食品安全风险评估中心编写的《2012年食源性致病菌监测工作手册》相关检测项目的方法进行。
1.2.1 阪崎肠杆菌定量（MPN法） 称取样品100，10，1g各3份，加入已预热至44℃分别盛有900，90，9mLBPW中，轻轻振摇使充分溶解，制成1∶10样品匀液，置36℃培养18h。分别移取1mL转种于10mLmLST-Vm肉汤，44℃培养24h。轻轻混匀mLST-Vm肉汤培养物各取1环分别划线接种于DFI显色琼脂平板，36℃培养24h。挑取1-5个可疑蓝绿色菌落，划线接种于TSA平板，25℃培养48h。从TSA平板上挑取可疑黄色菌落进行染色镜检、氧化酶试验等初步鉴定试验后进行确认试验，选用API鉴定系统ID32E试验条，将菌液加入试验条每一个小管，36℃培养24h，由ATB自动细菌鉴定仪读取。
1.2.2 金黄色葡萄球菌定量（MPN计数法） 称取25克样品加入225mL生理盐水，轻轻振摇使充分溶解，制成1∶10样品匀液，取上述1∶10的样品均液稀释成1∶100、1∶1000，选择这3个稀释度，每个稀释度各取1mL分别接种3管10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤管，36℃培养48h，转种Baird-Parker平板36℃培养48h，观察菌落形态特征，挑取菌落直径为2MM-3MM，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈的可疑菌落进行革兰氏染色镜检，转种血平板、BHI肉汤和营养琼脂斜面，36℃培养18h，进行血浆凝固酶试验。
1.2.3 蜡样芽胞杆菌定量（MPN计数法） 称取样品25g加入225mL生理盐水，制成1∶10样品匀液，取上述1∶10的样品均液稀释成1∶100、1∶1000，选择这3个稀释度，每个稀释度各取1mL分别接种3管10mL胰酪胨大豆多粘菌素肉汤中，30℃培养48h，用接种环从各管中分别移取一环，划线接种到MYP琼脂平板，30℃培养24h，从平板上挑取呈粉红色不透明、边缘不整齐、周围有淡红色沉淀环的可疑菌落进行染色镜检，并接种营养琼脂平板做纯培养，30℃培养24h，挑取纯培养物做生化鉴定确认。
2 结 果
2.1 阪崎肠杆菌检出情况 20份不同品牌的样品中，检出3份阪歧肠杆菌，检出率15%（3/20），其中7份婴幼儿谷物辅助食品中有3份检出阪歧肠杆菌，检出率42.9%（3/7），13份婴幼儿配方奶粉未检出阪歧肠杆菌。3份阪歧肠杆菌检出量分别是2.3、24、24MPN/100g。上述菌株经广西壮族自治区疾病预防控制中心确证实验，结果均符合阪歧肠杆菌生物学特性。3株阪歧肠杆菌生化鉴定结果，见表1。
2.2 金黄色葡萄球菌检出情况 20份不同品牌的样品中，7份婴幼儿谷物辅助食品和13份婴幼儿配方奶粉均未检出金黄色葡萄球菌。
2.3 蜡样芽胞杆菌检出情况 20份不同品牌的样品中，检出7份蜡样芽胞杆菌，检出率35%（7/20）。其中7份婴幼儿谷物辅助食品有3份检出蜡样芽胞杆菌，检出率42.9%（3/7）；13份婴幼儿配方奶粉有4份检出蜡样芽胞杆菌，检出率30.8%（4/13），其中2份羊奶中有1份检出蜡样芽胞杆菌，检出率50%（1/2），检出量在3.0-23MPN/g之间不等。上述菌株经广西壮族自治区疾病预防控制中心确证实验，结果均符合蜡样芽胞杆菌生物学特性，7株蜡样芽胞杆菌确证实验结果，见表2。
3 讨 论
这是首次在浦北县市售的婴幼儿谷物类辅助食品中检出阪歧肠杆菌、蜡样芽胞杆菌，配方奶粉只检出蜡样芽胞杆菌暂未检出阪歧肠杆菌和金黄色葡萄球菌，但不表示其无阪歧肠杆菌和金黄色葡萄球菌污染的风险，相对来说，婴幼儿谷物类辅助食品比奶粉污染还大。据了解，阪歧肠杆菌是一种“条件致病菌”，一旦在奶制品中出现，食用者可能会发生腹泻等症状。临床研究证明，阪歧肠杆菌的主要危害对象是早产儿等免疫力低下的新生儿，在少数情况下可能会引起新生儿脑膜炎或菌血症。目前，微生物学家尚不清楚阪歧肠杆菌的污染来源，但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。婴幼儿配方奶粉中阪歧肠杆菌的污染问题是近几年FAO/WHO关注的新焦点。
本次检出食品中污染的阪歧肠杆菌、蜡样芽胞杆菌的菌量都不是很少，对婴幼儿的安全有潜在的威胁。这3种菌在自然界分布广泛，可通过原料和添加剂的途径污染，也可于喂养婴幼儿前被污染。婴幼儿配方奶粉是新生儿重要的营养平衡和补充食品，其安全性直接关系新生儿的健康。
本次调查显示浦北县市售的婴幼儿配方食品存在着阪歧肠杆菌、蜡样芽胞杆菌的污染，对广大婴幼儿食品安全构成了威胁，应引起食品安全监督管理部门的重视，应加大对婴幼儿食品的监测调查，保障婴幼儿的健康。
参考文献
[1] GB/T4789.14-2003 食品卫生微生物学检验.蜡样芽胞杆菌检验[S].
[2] GB4789.10-2010 食品微生物学检验.金黄色葡萄球菌检验[S].
[3] GB4789.40-2010 食品微生物学检验.阪崎肠杆菌检验[S].
[4] 王芳，王金玲，贾琳，等.奶粉中阪歧肠杆菌的分离与鉴定[J].中国食品卫生杂志，2007，19（1）：52-53.
[5] 广州市售国产婴幼儿配方粉中阪歧肠杆菌污染调查[J].中国卫生检验杂志，2010，（01）.