【摘 要】
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蚕丝主要由丝素和丝胶蛋白组成,其中丝素包括丝素重链,丝素轻链和P25蛋白。丝素重链蛋白分子量大,体外表达困难,难以分离纯化,很难对其结构进行研究。本文通过对丝素重链基因
【机 构】
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西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室,西南大学生物技术学院,中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室
【基金项目】
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西南大学“国家级大学生创新创业训练计划”项目(201410635046), 生物大分子国家重点实验室开放基金(2015kf08), 中央高校基本科研业务费(SWU112111,XDJK2013A019,SWU112086,XDJK2013C049)
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蚕丝主要由丝素和丝胶蛋白组成,其中丝素包括丝素重链,丝素轻链和P25蛋白。丝素重链蛋白分子量大,体外表达困难,难以分离纯化,很难对其结构进行研究。本文通过对丝素重链基因的分析,以家蚕5龄3d后部丝腺cDNA为模板,克隆获得了丝素重链C末端碱基序列,并将其构建到pET-50b(+)表达载体上,转入到大肠杆菌中进行表达,通过镍柱亲和层析纯化获得了丝素重链C末端的融合蛋白,为进一步研究蚕丝蛋白的折叠和组装奠定了研究基础。
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