抑制差减杂交克隆E1 Tor霍乱弧菌流行株与非流行株基因组差异片段及其分析

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weijie1314
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为了克隆与分析霍乱弧菌O1E1Tor流行株与非流行株两类菌株基因组差异片段 ,采用抑制差减杂交技术 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)分别以国内保留的流行株Wujiang 2及非流行株Js 32一株作为被检菌 ,另一株作为参考菌进行基因组差异研究 .在进行的差减杂交实验中 ,流行株Wujiang 2共检出 34个特异差异片段 ,经同源检索共代表 35个基因片段 ,其中包括许多重要的霍乱弧菌毒力相关基因如CTX遗传单元、TLC因子及可移动外来成分如霍乱弧菌整合子RVC序列及Tn10转位酶 .非流行株Js 32共检出 14个特异差异片段 ,经同源检索未能检出同源片段 ,可能代表新基因序列 .研究表明 ,霍乱弧菌流行株与非流行株基因组存在较多差异基因 ,表现在毒力、毒力相关基因、代谢以及其它噬菌体等可转移的基因成分 In order to clone and analyze the genomic difference fragments of the two strains of epidemic strains and non-epidemic strains of Vibrio cholerae O1E1Tor, suppress domesticated epidemic strain Wujiang 2 and non-epidemic strain Js 32 were used as suppressantsububctive hybridization (SSH) Were tested for bacteria and another strain was used as a reference strain for genomic differences study.In the subtractive hybridization experiments, 34 specific fragments were found in the endemic strain Wujiang 2, 35 gene fragments were represented by homologous search, including A number of important Vibrio cholera virulence-associated genes, such as the CTX  genetic element, the TLC factor, and moveable foreign components such as the RVC sequence of V. cholerae integrins and the Tn10 transposase, were detected in 14 non-endemic strains of Js 32 , Homologous search failed to detect homologous fragments, may represent the new gene sequence.Studies have shown that there are more genes in the genome of cholera epidemic strains and non-epidemic strains, manifested in virulence, virulence-related genes, metabolism and Other phage and other transferable gene components
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