人ODC基因第三外显子反义RNA腺病毒载体的构建

来源 :山东大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：kaiping56

【摘要】

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目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因第三外显子反义RNA的腺病毒载体.方法:RT-PCR方法克隆出人ODC基因第三外显子的片段,插入pMD18-T载体中,经Sal Ⅰ、Bgl Ⅱ酶切,插入穿梭质粒

【作者】

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张岩刘贤锡胡海燕耿昭王晓明张冰

【机构】

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山东大学医学院分子生物学实验中心

【出处】

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山东大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2003年4期

【关键词】

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鸟氨酸脱羧酶腺病毒载体反义RNA 外显子 Ornithine decarboxylaseAdenovirus vectorRNA antisense

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目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因第三外显子反义RNA的腺病毒载体.方法:RT-PCR方法克隆出人ODC基因第三外显子的片段,插入pMD18-T载体中,经Sal Ⅰ、Bgl Ⅱ酶切,插入穿梭质粒pAd-Track-CMV形成重组质粒pAdTrack-CMV-ODCr.经Pme Ⅰ酶切线性化后,转入pAdesy-1细菌中与含腺病毒基因骨架的质粒pAdesy-1同源重组.将重组质粒pAdesy-ODCr经Pac Ⅰ酶切后,转染293细胞包装成腺病毒颗粒,经荧光显微镜和PCR方法对重组腺病毒进行鉴定.结果:

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