【摘 要】
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利用改进的CTAB法提取出优质的草莓总RNA,可以稳定地进行RT-PCR.针对草莓斑驳病毒(SMoV)基因组序列设计筛选引物,对病毒基因组的不同区域进行扩增,扩增产物经克隆、测序证明
【基金项目】
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中国科学院资助项目,国家留学回国人员科研启动基金
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利用改进的CTAB法提取出优质的草莓总RNA,可以稳定地进行RT-PCR.针对草莓斑驳病毒(SMoV)基因组序列设计筛选引物,对病毒基因组的不同区域进行扩增,扩增产物经克隆、测序证明为SMoV的特异片段,与国外序列的同源性为91%~97%.为了监测RNA的质量和RT-PCR反应的正常进行,在检测体系中引入线粒体NADH脱氢酶基因ND2亚基作为内标,内标引物跨越内含子区域,只对剪接后的mRNA进行特异扩增,可以较好地监测整个检测过程.在国内首次建立了SMoV的RT-PCR检测体系,以优质的草莓总RNA为模板
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