【摘 要】
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用ＰＡ３１７包装细胞系包装人白细胞介素２（ｈＩＬ－２）基因逆转录病毒表达载体ｐＺｉｐ－ｈＩＬ－２后，获得高效价逆转录病毒（０．４～１．２）×１０５ｃｆｕ／ｍｌ。病毒感染人膀胱细胞系ＥＪ，通过Ｇ４１８抗性筛选及活性检测，得到一株高分泌ｈＩＬ－２（２６０Ｕ／ｍｌ）克隆ＥＪ／ｈＩＬ－２，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析证实ｈＩＬ－２基因已整合
【机 构】
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解放军总医院泌尿外科,军事医学科学院基础所
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用ＰＡ３１７包装细胞系包装人白细胞介素２（ｈＩＬ－２）基因逆转录病毒表达载体ｐＺｉｐ－ｈＩＬ－２后，获得高效价逆转录病毒（０．４～１．２）×１０５ｃｆｕ／ｍｌ。病毒感染人膀胱细胞系ＥＪ，通过Ｇ４１８抗性筛选及活性检测，得到一株高分泌ｈＩＬ－２（２６０Ｕ／ｍｌ）克隆ＥＪ／ｈＩＬ－２，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析证实ｈＩＬ－２基因已整合到ＥＪ／ｈＩＬ－２基因组中。转ｈＩＬ－２基因在人膀胱癌细胞中的高效表达，为人膀胱癌转ｈＩＬ－２基因瘤苗的应用研究打下了基础。
High titer retrovirus (0.4 ~ 1.2) × 105cfu / ml was obtained after packaging human interleukin 2 (hIL-2) gene retrovirus expression vector pZip-hIL-2 with PA317 packaging cell line. The human bladder cancer cell line EJ was infected by the virus, and a highly secreted hIL-2 (260U / ml) clone EJ / hIL-2 was obtained through G418 resistance screening and activity test. Southern blot analysis confirmed that the hIL-2 gene has been integrated into EJ / HIL-2 genome. The high expression of hIL-2 gene in human bladder cancer cells laid the foundation for the study of the application of hIL-2 gene in human bladder cancer.
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