【摘 要】
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目的 建立检测重组人血小板生成素(rhTPO)含量的改良双抗体夹心ELISA方法.方法 用棋盘滴定法确定包被单抗、一抗和酶标二抗的最佳丁作浓度;绘制标准曲线,确定线性范围、检测
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目的 建立检测重组人血小板生成素(rhTPO)含量的改良双抗体夹心ELISA方法.方法 用棋盘滴定法确定包被单抗、一抗和酶标二抗的最佳丁作浓度;绘制标准曲线,确定线性范围、检测限和定量限;检测该方法的准确性(回收率)、精密性和特异性,并与Lowry法检测结果进行比较.结果 包被单抗的最佳包被浓度为1.0 μg/ml,一抗和酶标二抗的最佳使用浓度分别为1∶5 000和1∶10 000;检测的线性范围为(125～4 000)pg/ml,检测限为75 pg/ml,定量限为189 pg/ml;不同浓度rhTPO的同收率在(97.0±2.1)%～(105.0±8.5)%之间;6批样品的试验内变异系数在3.2%～8.1%之间,试验间变异系数在5.7%～10.4%之间,特异性良好;与Lowry法检测结果具有良好的相关性.结论 已建立榆测rhTPO含量的改良双抗体夹心ELISA法,准确性、精密性、特异性良好,可用于rhTPO研究及生产过程中的定量分析.
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