【摘 要】
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目的研究结直肠癌组织中微小RNA-424-5p(miR-424-5p)与orthodenticle人同源盒基因1(OTX1) mRNA表达的关系，并探讨miR-424-5p对结直肠癌HCT116细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集2017年6月至2018年6月在昆明医科大学第三附属医院结直肠外科收治的60例结直肠癌患者，采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-424-5p和OTX1 mRN
【机 构】
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昆明医科大学第三附属医院（云南省肿瘤医院）结直肠外科 650106,昆明医科大学第三附属医院（云南省肿瘤医院）结直肠外科 650106,昆明医科大学第三附属医院（云南省肿瘤医院）结直肠外科 65010
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目的研究结直肠癌组织中微小RNA-424-5p(miR-424-5p)与orthodenticle人同源盒基因1(OTX1) mRNA表达的关系，并探讨miR-424-5p对结直肠癌HCT116细胞增殖、迁移和侵袭的影响。
方法收集2017年6月至2018年6月在昆明医科大学第三附属医院结直肠外科收治的60例结直肠癌患者，采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-424-5p和OTX1 mRNA在60对结直肠癌组织和癌旁组织以及结直肠癌HCT116细胞中的表达情况，并分析两者表达的相关性。HCT116细胞分别转染miR-NC(miR-NC组)和miR-424-5p-mimic(miR-424-5p-mimic组)，采用CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell实验分别检测miR-424-5p对HCT116细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响；Western blotting检测过表达miR-424-5p对OTX1蛋白表达的影响。荧光素酶报告实验检测miR-424-5p对OTX1-3′UTR报告载体荧光素酶活性的影响。
结果OTX1 mRNA在结直肠癌组织和癌旁组织中的相对表达量分别为1.049±0.446和0.639±0.178(t＝－6.583，P<0.001)；miR-424-5p在结直肠癌组织和癌旁组织中的相对表达量分别为0.865±0.261和1.329±0.387(t＝7.705，P<0.001)，差异均有统计学意义。结直肠癌组织中miR-424-5p和OTX1 mRNA的表达呈负相关(r＝－0.439，P＝0.015)。HCT116细胞转染miR-424-5p-mimic后第72、96和120 h时吸光度(A)值分别为0.813±0.064、0.960±0.098、1.287±0.192，转染miR-NC后第72、96和120 h时A值分别为1.163±0.158、1.645±0.117、2.043±0.236，miR-424-5p-mimic组细胞增殖能力显著低于miR-NC组，差异均具有统计学意义(t＝3.538，P＝0.024；t＝7.778，P＝0.001；t＝4.257，P＝0.013)。划痕实验结果显示，划痕24 h后miR-424-5p-mimic组与miR-NC组相比迁移能力显著减弱。miR-NC组和miR-424-5p-mimic组穿膜细胞数分别为(177.104±17.834)个和(35.667±13.634)个，差异有统计学意义(t＝15.246，P<0.001)。OTX1蛋白在miR-NC组和miR-424-5p-mimic组中的相对表达量分别为0.862±0.121、0.342±0.103，差异有统计学意义(t＝16.286，P<0.001)。荧光素酶实验结果显示，过表达miR-424-5p后，wt-OTX1-3′UTR和mut-OTX1-3′UTR报告载体的荧光素酶活性分别为0.305±0.095和0.898±0.080，差异有统计学意义(P<0.001)。
结论miR-424-5p与OTX1 mRNA在结直肠癌组织中的表达呈负相关，miR-424-5p可通过下调OTX1的表达抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。
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