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目的：构建靶向NBS1基因的microRNA真核表达载体，鉴定其转染宫颈癌细胞株Hela后的生物活性。方法：根据NBSlmRNA序列设计合成4对pre-microRNA片段，定向克隆到pcDNA6．2-GW／EmGFP-miR真核表达载体上，并将其转染至Hela细胞株中。采用茵落PCR和测序分析鉴定插入序列的完整性；采用实时荧光定量PCR和Western blot检测鉴定重组体对NBS1基因表达的干扰效果以确定其生物活性。结果：构建的4组重组体插入片段的碱基序列完全正确。重组体能干扰Hela细胞NBS1基