日本血吸虫微粒体抗原的研究——Ⅱ.成虫微粒体抗原的提取、分离及其化学和免疫学特性

来源 :寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shilei881222
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用差速离心和琼脂糖CL-2B柱层析方法自日本血吸虫成虫匀浆中提取和分离微粒体抗原,用ELISA法对微粒体粗抗原(JAMA-C)、尿素溶解部分(JMC)和提纯的微粒体抗原(JAMA)的敏感性和特异性进行了比较。在动力学一ELISA测定中JAMA抗原对同种抗体呈现出高的活力,达到8.8单位。试验蛔虫、肝吸虫、肺吸虫病患者血清各3份,旋毛虫病猴血清1份,结果均低于1单位,未出现交叉反应。在微量滴定板ELISA中亦呈现高敏感性和特异性,证明经过纯化,特异性活力增加。与微粒体抗原相比,胞液及尿素溶解性核抗原的活力很低。SDS-聚丙烯酰胺电泳及SDS-PAGE的电泳转移酶标免疫印斑的结果证明JAMA是由分子量14,400至200,000道尔顿以上的蛋白分子组成的不均一体,主要抗原成分的分子量在43,000道尔顿以上。 The microsomal antigens were extracted and separated from the homogenates of adult Schistosoma japonicum by differential centrifugation and agarose CL-2B column chromatography. The antimicrobial activity of microsomal antigens (JAMA-C), urea-solubilized fraction (JMC) The sensitivity and specificity of microsomal antigens (JAMA) were compared. The JAMA antigen showed high activity on alloantibodies in the kinetic-ELISA assay, reaching 8.8 units. Test roundworm, liver flukes, paragonimiasis patients serum 3 copies each, a serum of Trichinella infection monkey, the results were less than 1 unit, no cross-reaction. High sensitivity and specificity are also demonstrated in microtitre plate ELISA, demonstrating that after purification, specific viability is increased. Compared with microsomal antigens, cytosolic and urea-soluble nuclear antigens have low viability. Electrophoresis of SDS-polyacrylamide electrophoresis and SDS-PAGE Electrophoresis of immunoenzymatic blot results showed that JAMA is a heterogeneously composed of protein molecules with a molecular weight of 14,400 to more than 200,000 Daltons. The main antigen component has a molecular weight of 43,000 Dole Dayton above.
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