【摘 要】
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目的以重组G蛋白为检测抗原,应用间接ELISA方法检测狂犬病病毒抗体。方法根据GenBank公布的狂犬病病毒LEP-Flury株基因序列设计引物,PCR扩增出目的基因,连接pGM-T载体,重组质
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,河北北方学院动物科技学院
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目的以重组G蛋白为检测抗原,应用间接ELISA方法检测狂犬病病毒抗体。方法根据GenBank公布的狂犬病病毒LEP-Flury株基因序列设计引物,PCR扩增出目的基因,连接pGM-T载体,重组质粒经BamH I和XhoⅠ双酶切,连接到表达载体pGEX-6P-1,构建重组表达载体pGEX-G。将重组表达载体转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中,在IPTG诱导下表达目的蛋白,表达蛋白纯化后SDS-PAGE电泳分析并经Western blotting鉴定。纯化的G蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA方法检
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