几种克服昆明小鼠 2- 细胞胚胎发育阻滞的培养液研究

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比较了几种培养液对克服昆明小鼠胚胎 2 细胞发育阻滞的效果。实验 1的结果表明 ,在M16及CZB培养液基础上 ,加减几种成分得到的改进M16培养液 (用mM 16表示 )和改进的CZB培养液 (用mCZB表示 )均能有效克服 2 细胞阻滞现象。除去M 16和CZB培养液中的葡萄糖和磷酸盐后添加 5 5 5mmol/L (1g/L)果糖、2 5mmol/L牛磺酸、 10 0或110 μmol/LEDTA、 2mmol/L谷氨酰胺和 2 %必需氨基酸 (EAA)及 1%非必需氨基酸(NEA) ,均可支持体外培养的昆明小鼠 1 细胞胚胎发育到囊胚和孵化囊胚阶段。实验结果同时证明 ,TE培养液也具有良好的培养效果。 1 细胞胚胎在mM 16、TE和mCZB中培养后发育到囊胚的比率分别为 85 %、 85 %和 6 8%。实验 2的结果表明 ,在M 16培养液中单独添加 2 5mmol/L的牛磺酸也可支持体外培养的昆明小鼠 1 细胞胚胎发育到囊胚。在M16中同时添加 2 5mmol/L牛磺酸和 10 0 μmol/LEDTA两种成分可使 1 细胞胚胎的囊胚发育率达到 6 7%。通过比较分析我们认为牛磺酸对克服昆明小鼠胚胎 2 细胞阻滞起关键作用 ,而EDTA具有很好的协同作用
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