【摘 要】
：
目的:制备抗神经特异性表达的癌基因LMO3的多克隆抗体,进行LMO3分子检测和功能研究。方法:采用RT-PCR方法扩增LMO3的基因序列,构建其原核表达载体pET32a-LMO3。在大肠埃希菌
【机 构】
：
兰州军区兰州总医院医学实验中心,兰州军区兰州总医院神经内科,兰州大学附属第二医院输血科,
论文部分内容阅读
目的:制备抗神经特异性表达的癌基因LMO3的多克隆抗体,进行LMO3分子检测和功能研究。方法:采用RT-PCR方法扩增LMO3的基因序列,构建其原核表达载体pET32a-LMO3。在大肠埃希菌中诱导融合蛋白表达,SDS-PAGE分离纯化原核表达的融合蛋白,PBS溶解聚丙烯酰胺凝胶颗粒中的融合蛋白,乳化后免疫新西兰兔制备多克隆抗体。采用免疫印迹、免疫组化等对该抗体的特异性进行鉴定。结果:构建的重组质粒经酶切鉴定和测序证实序列正确。经诱导表达在相对分子质量为37×103处有一条明显的蛋白条带,与预期值一致;免疫动物所得抗血清效价为1∶16 000,该抗体能够识别原核表达的LMO3蛋白及细胞内源性表达的LMO3蛋白;免疫组化显示,LMO3在SHG44胶质瘤细胞株及脑胶质瘤组织中均有表达。结论:制备了能识别天然LMO3分子的抗LMO3的多克隆抗体,为检测LMO3分子的表达和进一步研究其功能提供了有力的工具。
其他文献
对于幼儿教育来说,良好生活习惯的培养对学龄前的幼儿阶段来说非常重要。但是如何科学地促进幼儿良好习惯的形成,可以积极借助儿歌的形式。作为一种文学形式,儿歌能够在幼儿
睾丸对电磁辐射具有高度敏感性,精子是雄性遗传信息的传递者,电磁辐射可致睾丸结构和功能损伤以及附睾精子活力下降、畸形率增加、超微结构改变、遗传物质损伤。而生精细胞能
<正>1用药原则1.1辨证论治慢性病毒性肝炎是指由不同肝炎病毒引起、病程超过半年、肝组织病理学呈现慢性炎症的一组疾病。慢性病毒性肝炎属于中医学的"黄疸""胁痛""癥积""虚
苏联教育学出版社于1990年末出版了一卷本的《赞科夫教育著作选集》,其中收入了经过编者修订的三本著作:《教学论与生活》、《教学与发展》和《和教师的谈话》。《选集》开头
<正>空军场站医院属于基层卫生保障机构,承担着空军基层部队官兵卫勤保障任务,其建设质量直接影响基层官兵健康和部队战斗力。现就加强空军基层部队卫生机构建设问题探讨如下
对固原市林木种苗及经济林产业发展状况进行了调查,分析了固原市林木种苗及经济林产业发展状况及林木种苗和经济林产业发展中存在问题,提出了固原市发展林木种苗及经济林产业
目的:探讨自身免疫异常对不明原因性不孕女性IVF妊娠结局的影响。方法:选择2002年1月～2006年7月由于不明原因性不孕而接受IVF-ET治疗的女性236例,其中血清抗磷脂抗体(APA)阳性
目的:对比渗透性树脂与氟漆治疗正畸后白垩斑效果。方法:选取我院治疗的牙齿正畸后白垩斑患者总共50例,随机分为两组,每组25例患者。一组采用氟漆治疗,作为对照组;一组采用渗
针对宁夏水稻生产的实际情况,介绍了工厂化育秧技术的术语和定义,对工艺流程、种子准备、置床处理、床土准备、育秧及大棚管理进行了技术规范。