丹酚酸C对MPP~+损伤的SH-SY5Y细胞氧化应激和凋亡的抑制作用

来源 :中国药理学与毒理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Gerryliu1984
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目的研究丹酚酸C对MPP+诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用。方法 SH-SY5Y细胞与丹酚酸C(0.1,1.0和5.0μmol·L-1)或阳性药N-乙酰半胱氨酸(NAC)5 mmol·L-1孵育2 h后加入MPP+500μmol·L-1,继续培养24 h。MTT法检测细胞存活率,AO/EB染色观察细胞形态及凋亡,应用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,线粒体超氧化物指示剂(Mito SOX)特异性探针检测线粒体超氧化物水平,JC-1检测线粒体膜电位,免疫荧光法测定NADPH氧化酶2(NOX2)的表达,免疫荧光和Western蛋白质印迹法检测细胞色素c,Bcl-2,Bax和活化的胱天蛋白酶3的表达水平。结果 MPP+500μmol·L-1损伤导致细胞存活率显著降低(P<0.01),丹酚酸C(1.0和5.0μmol·L-1)及NAC(5 mmol·L-1)能够逆转MPP+损伤,显著提高细胞存活率(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。丹酚酸C(1.0和5.0μmol·L-1)能够显著减少MPP+诱导的细胞总ROS增加(P<0.01),维持Bax/Bcl-2表达平衡(P<0.01),减缓线粒体膜电位降低(P<0.05,P<0.01),减少细胞色素c的释放(P<0.01)及胱天蛋白酶3的活化(P<0.05,P<0.01)。同时,丹酚酸C(0.1,1.0和5.0μmol·L-1)能够明显抑制NOX2的表达(P<0.01),降低线粒体内超氧化物水平(P<0.01),改善MPP+引起的细胞氧化应激状态。结论丹酚酸C能够抑制MPP+诱发的SH-SY5Y细胞氧化应激及其介导的细胞凋亡。
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