【摘 要】
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目的利用含红色荧光报告基因（DsRed）的pGCsi-U6／Neo／DsRed／质粒构建干扰人红系特异的γ-氨基-6-酮戊酸合成酶（eALAS）基因表达的短发夹RNA（shRNA）表达载体，并进行活性鉴定。方法根据GenB
【机 构】
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广州军区武汉总医院,第二军医大学长海医院
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目的利用含红色荧光报告基因（DsRed）的pGCsi-U6／Neo／DsRed／质粒构建干扰人红系特异的γ-氨基-6-酮戊酸合成酶（eALAS）基因表达的短发夹RNA（shRNA）表达载体，并进行活性鉴定。方法根据GenBank中eALAS的序列，设计3条表达shRNA的互补DNA序列，分别克隆至质粒载体pGCsi-U6／Neo／DsRed中构建重组质粒，转化大肠杆菌DHSa菌株扩增后，提取质粒测序分析，以相同的方法构建并鉴定eALAS基因的真核表达载体pEGFP-N1-eALAS；将3种pGCsi-U6
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