【摘 要】
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为提高常规稀释复性方法的复性效率,以重组绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）包涵体为模型,开发一种新的双变性-稀释复性方法。新方法选取含有精氨酸的碱性复合溶液
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,生物芯片上海国家工程研究中心,华南理工大学生物科学与工程学院
【基金项目】
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国家“863”计划项目（2007AA021702）, 国家“973”计划项目（2007CB512402）, 广州市科技计划项目（2007J1-C0131）
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为提高常规稀释复性方法的复性效率,以重组绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）包涵体为模型,开发一种新的双变性-稀释复性方法。新方法选取含有精氨酸的碱性复合溶液作为第一变性剂溶解GFP包涵体,通过梯度降低变性液的酸碱度析出溶解目的蛋白,再以尿素为第二变性剂溶解析出的蛋白,随后进行稀释复性。结果显示：与常规方法比,新方法复性的绿色荧光蛋白活性收率提高至1.5～2.3倍,复性蛋白对温度、溶液酸碱度及变性剂的稳定性提高。增强型绿色荧光蛋白（enhanced GFP,EGFP）
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