携带肝细胞生长因子基因的减毒鼠伤寒沙门菌对溃疡性结肠炎大鼠免疫的影响

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目的:探讨携带肝细胞生长因子基因的减毒鼠伤寒沙门茵对TNBS诱发大鼠实验性结肠炎模型外周血T细胞亚群和免疫球蛋白的影响。方法:50只Wistar大鼠经TNBS灌肠诱发溃疡性结肠炎模型,并随机分为4组:Ty治疗组、Typl-HGF治疗组、Yypl-GFP观察组、模型对照组,除模型对照组20只外,其余每组10只;另设生理盐水灌肠的正常对照组10只。造模后第3天各组灌胃进行治疗,依次给予1×109cfu的Ty、Typl-HGF、Typl-GFP茵液,每只0.5ml,隔日1次,模型和正常对照组给予同体积的100g/LNaHCO3。3次和6次灌胃后1周,各组分别采集全血,用流式细胞仪检测各组CD4+T、CD8+T、IgM、IgG1、IgA水平;Typl-GFP组观察目的基因的组织表达。结果:灌胃3次和6次后模型对照组与正常对照组相比CD4+T细胞均无明显变化,但CD8+T细胞下降明显(P<0.01),CD4+/CD8+T比值明显升高(P<0.05);Typl-HGF组3次灌胃后CD4+T低于模型组(P<0.05),6次灌胃后CD4+T、CD4+/CD8+T比值均明显低于模型对照组和Ty组(P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05)。灌胃3次和6次后模型对照组与正常对照组相比IgM、IgG1、IgA均明显增加(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01);灌胃3次和6次Ty组与同期模型对照组、Typl-HGF组相比IgM明显增加(P<0.01,P<0.01),而6次Typl-HGF组与模型对照组相比IgM、IgG,明显降低(P<0.05,P<0.05)。在荧光显微镜下可观察到Typl-GFP茵液灌胃后在结肠组织GFP强表达。结论:大鼠实验性结肠炎发病过程中,机体免疫功能处于亢进状态,Typl-HGF能够抑制T细胞增殖和B淋巴细胞抗体的产生,它可能代表了一种新的药物用于治疗结肠炎疾病。 Objective: To investigate the effects of attenuated Salmonella typhimurium carrying hepatocyte growth factor gene on T lymphocyte subsets and immunoglobulins in TNBS-induced experimental colitis in rats. Methods: Fifty Wistar rats were induced by TNBS enema and divided into four groups at random: Ty treatment group, Typl-HGF treatment group, Yypl-GFP observation group, model control group, 20 rats in model control group , The rest of each group of 10; another normal saline enema control group of 10. On the 3rd day after model establishment, each group was treated with gavage by intragastric administration, followed by 1 × 109 cfu of Ty, Typl-HGF, Typl-GFP inoculum, 0.5 ml each time, once every other day, and the same volume of 100 g /LNaHCO3.3 times and 6 times one week after gavage, the whole blood samples were collected from each group, and the levels of CD4 + T, CD8 + T, IgM, IgG1 and IgA in each group were detected by flow cytometry; Tissue expression of genes. Results: Compared with the normal control group, there was no significant change in the CD4 + T cells in the model control group after 3 and 6 times of gavage, but the level of CD8 + T cells decreased significantly (P <0.01) and the ratio of CD4 + / CD8 + T increased significantly (P <0.05). The levels of CD4 + T and CD4 + / CD8 + T were significantly lower in the Typl-HGF group than those in the untreated group (P <0.05) And Ty group (P <0.01, P <0.01, P <0.05, P <0.05). Compared with the normal control group, the levels of IgM, IgG1 and IgA in the model control group increased significantly (P <0.05, P <0.05, P <0.05, P <0.01, P <0.01, P <0.01) (P <0.01, P <0.01). Compared with the model control group, the levels of IgM, IgG significantly decreased (P <0.05, P <0.05). In the fluorescence microscope can be observed Typl-GFP Yin fluid gavage in the colon GFP strong expression. Conclusion: The immune function of rats is hyperactive during the pathogenesis of experimental colitis. Typl-HGF can inhibit T cell proliferation and B lymphocyte antibody production, which may represent a new drug for the treatment of colitis .
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