【摘 要】
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目的构建一种靶向MR-1基因的shRNA稳定表达载体，并检验其对白血病K562细胞增殖能力的影响。方法以带有H1启动子可稳定表达靶基因shRNA的pCD．shRNA为载体，采用BamHI和HindIII酶切
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所肿瘤室
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目的构建一种靶向MR-1基因的shRNA稳定表达载体，并检验其对白血病K562细胞增殖能力的影响。方法以带有H1启动子可稳定表达靶基因shRNA的pCD．shRNA为载体，采用BamHI和HindIII酶切pCD—shRNA并回收线性空载体，采用T4DNA连接酶将MR-1shRNA模板DNA双链与酶切后线性化的载体连接，从而建立稳定表达MR-1-shRNA的载体。将构建的pCD—shRNA．MR-1载体转染人白血病K562细胞，建立稳定沉默MR-1的细胞系，采用细胞计数法和westernblot对MR-1
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