【摘 要】
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为了研究来源于番木瓜(Carica papaya)的几丁质酶在毕赤酵母中异源表达、表征及水解产物,笔者重新设计了来源于番木瓜的几丁质酶基因序列,命名为cpchi19.将cpchi19构建到毕赤酵母表达载体pGBG1中得到重组菌,通过质粒构建、发酵表达、酶学性质研究及对低脱乙酰度壳聚糖酶解产物进行分析.该几丁质酶在毕赤酵母中表达量为0.18 mg/mL,酶活为0.32 U/mL;最适pH和温度分别为5.6和75℃;该酶在70℃及以下较稳定.超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF MS)分析发
【机 构】
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中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京100190
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为了研究来源于番木瓜(Carica papaya)的几丁质酶在毕赤酵母中异源表达、表征及水解产物,笔者重新设计了来源于番木瓜的几丁质酶基因序列,命名为cpchi19.将cpchi19构建到毕赤酵母表达载体pGBG1中得到重组菌,通过质粒构建、发酵表达、酶学性质研究及对低脱乙酰度壳聚糖酶解产物进行分析.该几丁质酶在毕赤酵母中表达量为0.18 mg/mL,酶活为0.32 U/mL;最适pH和温度分别为5.6和75℃;该酶在70℃及以下较稳定.超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF MS)分析发现,水解主要产物为聚合度2～20、不同脱乙酰度的38个壳寡糖组分.核磁共振(NMR)分析显示,部分乙酰化壳寡糖的还原末端主要为N-乙酰氨基葡萄糖,同时含少量氨基葡萄糖,而非还原末端则同时包含N-乙酰氨基葡萄糖及氨基葡萄糖.来源于番木瓜的几丁质酶在毕赤酵母中实现表达并成功制备低脱乙酰度壳寡糖,为该酶及其水解产物的应用提供了理论支撑.
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通过质量法研究了常压状态下奥美拉唑在水和乙醇二元溶剂混合物中的固液平衡情况.将溶解度数据采用改进的Apelblat模型、近理想二元溶剂/Redich-Kister(CNIBS/R-K)模型和Jouyban-Acree模型进行拟合分析.计算结果表明:Apelblat模型的结果因其与测量值有较小的标准偏差,而优于其他模型,可以通过其他2个模型实现对修正的Apelblat模型的补充完善.此外,计算的热力学参数表明:在所研究的每种溶剂中,奥美拉唑的溶解都是吸热、非自发和焓驱动的过程.本研究能为奥美拉唑的意义化萃取
离子交换树脂因具有吸附率高、选择性高等优点常被用于有机酸的原位分离.本文首先筛选了对富马酸具有较高吸附能力的D201树脂作为吸附树脂,然后进一步探究了pH和温度的影响.结果 发现:D201树脂对富马酸离子形式的吸附能力从大到小顺序为HFA-、FA2-、H2FA;且HFA-吸附到树脂上仅占据一个吸附位点,FA2-可能占据两个吸附位点,吸附位点利用率降低;分子形式的H2FA通过疏水相互作用被吸附到树脂骨架上;吸附过程属于吸热反应(△H＞0),升温有助于吸附.对解吸条件进行了优化,最佳的解吸条件是NaCl为解吸
牛磺熊去氧胆酸是胆酸类药物,在治疗胆固醇等疾病中具有显著疗效.以鹅去氧胆酸为起始原料,经过氧化和还原反应,形成熊去氧胆酸,再经过混合酸酐法形成牛磺熊去氧胆酸粗品,丙酮和水重结晶得到高纯度的牛磺熊去氧胆酸,总产率达到68.75％.合成产物经核磁共振(1H NMR)和质谱(MS)结构确证.该工艺操作简单,产率较高,适合工业化发展.
探究雷公藤甲素对小鼠睾丸和附睾的毒性作用及其分子作用机制.将小鼠分为正常组和雷公藤甲素模型组,正常组小鼠腹腔注射生理盐水,质量浓度为0.1 mL/10 g;模型组小鼠腹腔注射雷公藤甲素,质量浓度为120μg/kg,连续14 d,于给药结束后,取睾丸和附睾组织分别检测睾丸和附睾指数,进行精子计数和染色,组织形态学分析,氧化应激指标的测定,睾丸和附睾组织的过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)和8-羟脱氧乌苷(8-OHdG)的免疫组化分析.结果 显示:与正常组相比,模型组小鼠睾丸和附睾指数
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