锌指蛋白Zbed3的表达与分离纯化

来源 :上海交通大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：eusnkk

【摘要】

：

将编码小鼠锌指蛋白Zbed3的基因克隆到大肠杆菌表达载体pET28c,构建了含组氨酸标签的表达质粒pET28c-Zbed3,并将其转入大肠杆菌BL21-CodonPlus（DE3）-RP;在20℃条件下,采用100μ

【作者】

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王琳童耕雷邹永水

【机构】

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上海交通大学生命科学技术学院,中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所结构生物学客座实验室

【出处】

：

上海交通大学学报

【发表日期】

：

2011年1期

【关键词】

：

锌指蛋白Zbed3 表达包涵体纯化圆二色性光谱

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将编码小鼠锌指蛋白Zbed3的基因克隆到大肠杆菌表达载体pET28c,构建了含组氨酸标签的表达质粒pET28c-Zbed3,并将其转入大肠杆菌BL21-CodonPlus（DE3）-RP;在20℃条件下,采用100μmol/L的异丙基硫代--βD半乳糖苷（IPTG）诱导、培养20 h而获得含Zbed3的菌体;菌体裂解液经超滤浓缩后采用镍（螯合）柱分离纯化得到锌指蛋白Zbed3（浓度达60 mg/L）;同时,采用30%醋酸溶解包涵体,用0.5 mol/L的Tris-HCl（pH=8.8）缓冲液中和而使Zbe

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