【摘 要】
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目的:进行沙门菌和志贺菌二联实时荧光PCR检测的研究,并探讨在CDC体检中临床检测的应用。方法:在沙门菌、志贺菌的fimY基因和ipaH基因保守区设计特异性引物和探针,对引物、探
【机 构】
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华南理工大学轻工与食品学院,深圳太太基因工程有限公司
【基金项目】
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教育部“新世纪优秀人才支持计划”项目(NCET06-0746);2007年省部产学研合作专项资金项目(2007B090400068)资助
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目的:进行沙门菌和志贺菌二联实时荧光PCR检测的研究,并探讨在CDC体检中临床检测的应用。方法:在沙门菌、志贺菌的fimY基因和ipaH基因保守区设计特异性引物和探针,对引物、探针、Mg2+浓度、Taq酶的用量、反应条件等进行优化,并与传统检测方法进行对比。结果:该方法从细菌核酸提取至完成检测仅需3 h左右,对两种菌的检测灵敏度均达到100 cfu/ml,检测自2007年11月以来CDC临床肛拭子样本5896份,实验结果与权威检验机构的结果符合率达100%。结论:二联实时荧光定量PCR可同时定量的检测出沙门菌和志贺菌,灵敏度高,特异性强,检测周期短。适用于CDC体检等同时对沙门菌和志贺菌的快速临床检测。
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