【摘 要】
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以B.subtilis XL-15基因组为模板,运用PCR法成功克隆了α-淀粉酶基因,其开放式阅读框（ORF）为1980bp,编码659个氨基酸残基。分别将该基因转入大肠杆菌BL21（DE3）和毕赤酵母GS115中,
【基金项目】
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十五863项目（生物柴油关键技术与应用研究,2003AA214061）和武汉市重点攻关项目
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以B.subtilis XL-15基因组为模板,运用PCR法成功克隆了α-淀粉酶基因,其开放式阅读框（ORF）为1980bp,编码659个氨基酸残基。分别将该基因转入大肠杆菌BL21（DE3）和毕赤酵母GS115中,进行诱导表达。结果表明,大肠杆菌破碎上清液中未检出酶活,SDS-PAGE电泳分析显示表达产物均以无活性包涵体存在;而毕赤酵母在α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,经高密度培养,表达产物分泌至胞外,发酵液酶活力为4.3U/ml,实现了B.subtilis α-淀粉酶基因的分泌
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