一种优化翻译起始效率的方法

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：miaoyuan3660346

【摘要】

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本文以人分裂细胞核抗原(PCNA)基因作为目的基因,把包括PCNA基因5′端非翻译区(5′NTR)的24bp和编码38个氨基酸114 bp的顺序插入pTZ19R,构建与LacZ’5′端的融合基因。用寡核

【作者】

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王易伦郭瀛军戴建新裘敏燕陆长德

【机构】

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第二军医大学分子遗传教研室,中国科学院上海生物化学研究所,中国科学院上海生物化学研究所上海200433,上海200433,上海200032,上海200032

【出处】

：

生物技术通讯

【发表日期】

：

1995年2期

【关键词】

：

翻译起始表达调控 T7 RNA聚合酶 Β-半乳糖苷酶

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本文以人分裂细胞核抗原(PCNA)基因作为目的基因,把包括PCNA基因5′端非翻译区(5′NTR)的24bp和编码38个氨基酸114 bp的顺序插入pTZ19R,构建与LacZ’5′端的融合基因。用寡核苷酸定点突变法在PCNA 5′NTR形成SD顺序,再用PCR法在SD顺序左右两侧分别随机突变6个和7个碱基,使它们与结构基因5′端顺序自发地形成各种可能的翻译起始区(TIR)二级结构。重组质粒转化JM109(DE3),以T7 RNA聚合酶-T7启动子调控转录。对288个重组子的β-gal活性测定表明,不同重

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