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【摘 要】 目的:通过研究比较不同产地黄苓中黄苓苷的含量的不同。方法:以河北承德和陕西岚县的黄苓为例,通过液相色谱分析法对两地黄苓成分进行分析。结果:经研究发现河北黄苓中黄苓苷的含量大约是每克中含有301.499毫克,山西黄苓中黄苓苷的含量大约是每克中含有249.021毫克,根据统计学结果分析得知两地的黄苓中黄苓苷的含量差异极大。结论:从黄苓苷的含量来看,认为河北的黄苓的质量要比山西的好。
【关键词】 不同产地 黄苓 黄苓苷 含量
【中图分类号】 R285.5 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160(2014)10-0280-01
唇形科植物黄苓中的重要成分是黄苓苷、汉黄苓素等各种黄酮类化合物[1],均具有比较强的抗氧化能力,和抗药物变态的药理作用,由于黄苓中黄苓苷的含量非常大,因此在可以工作中认为黄苓苷可以代表黄酮化合物的含量,方便科研工作的开展。《中国药典》以黄苓苷的含量来评定黄苓优劣[2],本文以河北承德和陕西岚县的黄苓为例,分析不同产地黄苓的质量。
1 资料与方法
1.1 一般资料
分别从河北承德和陕西岚县购买经过西安药物中心鉴定认为是唇形科黄苓的干燥根样本适量,并在西安天然有机物信息中心购买纯度为98.5%以上的黄苓药材适量作为黄苓的对照品,研究使用的色谱纯和分析纯分别是甲醇和磷酸,色谱柱采用的是Dim为250×4.6毫米、particle Sz为5微米的Thermo HYPERSIL ODS柱,液相分析仪采用的是Agilent 1100。
1.2 分析方法
1.2.1 制备各类溶液
首先在80度恒温下将黄苓药材研为粉末,使其干燥直至重量恒定,取其中1克放入试剂瓶中,加入纯度为0.5的甲醇溶液20毫升,在超声波条件下溶解半小时,然后再用同浓度的甲醇溶液补充损失的重量,经充分溶解并过滤后,取其中的5毫升在用同浓度的甲醇溶液配比为250毫升摇匀备用,此为黄苓药品制备液[3]。
再精确称量黄苓对照品溶于浓度为0.5的甲醇溶液中,分别制成浓度为3.3 ×10-3、5.5×10-3、1.1 ×10-2、1.65 ×10-2、2.2 ×10-2、2.75 ×10-2mg /mL的溶液,在4度恒温下保存备用,此为黄苓对照品制备液。
1.2.2 实验条件准备
色谱柱的温度控制在25度,流动相为浓度为0.3%的磷酸溶液,可检测波长为278纳米,流动速度为每分钟0.8毫升,进样体积为10微升。
1.2.3 试验方法
把配制好的黄苓对照品制备液在上述色谱环境中进行测定,对测定结果在纵坐标为峰面积、横坐标为对照品浓度的坐标系中进行回归分析,发现在浓度在3.3 ×10-3-2.75 ×10-2mg /mL之间呈现出良好的线性关系。
取等量的5份河北黄苓样本按照上述方法制备黄苓药品制备液分别测定样本,计算得到在峰面积为2%以上的色谱中其相对标准差是1.05%。
取河北黄苓药品制备液1份,分别在制液后的0、2、4、8、12、24小时进样,计算得到在峰面积为2%以上的色谱中其相对标准差是1.12%。
取河北黄苓药品制备液1份,连续5次进样,计算得到在峰面积为2%以上的色谱中其相对标准差是0.83%。
通过加样回收的方法取出已确切测得黄苓苷含量的5份河北黄苓药材0.001克,分别向其中加入浓度为2.2 ×10-2mg /mL的黄苓对照品制备液1、2、3、4、5毫升,制成黄苓药品制备液,进样10微升,记录色谱峰的面积,计算出回收率的平均值为98. 65%,相对标准差是0.23%。
取出河北黄苓药品制备液10微升,注入色譜仪进行分析,利用回归方程计算出黄苓苷的含量。
对山西黄苓苷药品按以上步骤进行操作测量得出黄苓苷含量[4]。
2 结果
经测量后得到河北和山西黄苓黄苓苷的含量情况如下表1所示。
3 讨论
在进行黄苓苷含量的测定时,由于黄苓中的黄酮类化合物的极性有比较大的差异,同一分离相的分离效果不是很好,因此在本次研究试验中用到了等度洗脱,结果表明分离效果很好;另外试验中流动相采用的浓度为0.3%的磷酸,是因为黄苓苷虽然在碱性溶液中更容易溶解,但容易氧化黄苓苷,因此使用酸性溶液更容易使黄苓苷洗脱。
经过本次研究的测量,得到河北承德的黄苓黄苓苷含量为301.499mg/g、山西岚县的黄苓黄苓苷含量为249.021mg/g由此可见,两地的黄苓中黄苓苷的含量具有明显的差异,以黄苓苷的含量为标准来判断,河北的黄苓质量要比陕西的质量好。于晶[5]等人也对河北和山西的黄苓汇总黄苓苷的含量进行了研究,发现虽然山西黄苓在植物的高度、根部的性状方面都比河北的好,但黄苓苷的含量与之相比略显逊色,这与本文的研究结果相吻合。
参考文献
[1]侯华新,黎丹戎,秦箐,张玮,邱莉,吴华慧.黄芩黄酮A对人肝癌细胞7402的抑制能力及体外增效作用[J].中国临床药学杂志,2011(23).
[2]温华珍,肖王义明,罗国安.HPLC 法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量[J].中草药,2013(16).
[3]周晓宁,杨滨.高效液相色谱-电化学检测法测定黄芩中3种有效成分的含量[J].中国中药杂志,2012,31(21):47-50.
[4]张箭,肖丽和,李发美.RP-HPLC法测定黄芩属四种药材中五个活性成分的含量[J].中药材,2012,28(15):389-391.
[5]于晶,陈君,肖新月.不同来源黄芩产量及质量性状的比较研究[J].中国中药杂志,2012,30(17):491-494.
【关键词】 不同产地 黄苓 黄苓苷 含量
【中图分类号】 R285.5 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160(2014)10-0280-01
唇形科植物黄苓中的重要成分是黄苓苷、汉黄苓素等各种黄酮类化合物[1],均具有比较强的抗氧化能力,和抗药物变态的药理作用,由于黄苓中黄苓苷的含量非常大,因此在可以工作中认为黄苓苷可以代表黄酮化合物的含量,方便科研工作的开展。《中国药典》以黄苓苷的含量来评定黄苓优劣[2],本文以河北承德和陕西岚县的黄苓为例,分析不同产地黄苓的质量。
1 资料与方法
1.1 一般资料
分别从河北承德和陕西岚县购买经过西安药物中心鉴定认为是唇形科黄苓的干燥根样本适量,并在西安天然有机物信息中心购买纯度为98.5%以上的黄苓药材适量作为黄苓的对照品,研究使用的色谱纯和分析纯分别是甲醇和磷酸,色谱柱采用的是Dim为250×4.6毫米、particle Sz为5微米的Thermo HYPERSIL ODS柱,液相分析仪采用的是Agilent 1100。
1.2 分析方法
1.2.1 制备各类溶液
首先在80度恒温下将黄苓药材研为粉末,使其干燥直至重量恒定,取其中1克放入试剂瓶中,加入纯度为0.5的甲醇溶液20毫升,在超声波条件下溶解半小时,然后再用同浓度的甲醇溶液补充损失的重量,经充分溶解并过滤后,取其中的5毫升在用同浓度的甲醇溶液配比为250毫升摇匀备用,此为黄苓药品制备液[3]。
再精确称量黄苓对照品溶于浓度为0.5的甲醇溶液中,分别制成浓度为3.3 ×10-3、5.5×10-3、1.1 ×10-2、1.65 ×10-2、2.2 ×10-2、2.75 ×10-2mg /mL的溶液,在4度恒温下保存备用,此为黄苓对照品制备液。
1.2.2 实验条件准备
色谱柱的温度控制在25度,流动相为浓度为0.3%的磷酸溶液,可检测波长为278纳米,流动速度为每分钟0.8毫升,进样体积为10微升。
1.2.3 试验方法
把配制好的黄苓对照品制备液在上述色谱环境中进行测定,对测定结果在纵坐标为峰面积、横坐标为对照品浓度的坐标系中进行回归分析,发现在浓度在3.3 ×10-3-2.75 ×10-2mg /mL之间呈现出良好的线性关系。
取等量的5份河北黄苓样本按照上述方法制备黄苓药品制备液分别测定样本,计算得到在峰面积为2%以上的色谱中其相对标准差是1.05%。
取河北黄苓药品制备液1份,分别在制液后的0、2、4、8、12、24小时进样,计算得到在峰面积为2%以上的色谱中其相对标准差是1.12%。
取河北黄苓药品制备液1份,连续5次进样,计算得到在峰面积为2%以上的色谱中其相对标准差是0.83%。
通过加样回收的方法取出已确切测得黄苓苷含量的5份河北黄苓药材0.001克,分别向其中加入浓度为2.2 ×10-2mg /mL的黄苓对照品制备液1、2、3、4、5毫升,制成黄苓药品制备液,进样10微升,记录色谱峰的面积,计算出回收率的平均值为98. 65%,相对标准差是0.23%。
取出河北黄苓药品制备液10微升,注入色譜仪进行分析,利用回归方程计算出黄苓苷的含量。
对山西黄苓苷药品按以上步骤进行操作测量得出黄苓苷含量[4]。
2 结果
经测量后得到河北和山西黄苓黄苓苷的含量情况如下表1所示。
3 讨论
在进行黄苓苷含量的测定时,由于黄苓中的黄酮类化合物的极性有比较大的差异,同一分离相的分离效果不是很好,因此在本次研究试验中用到了等度洗脱,结果表明分离效果很好;另外试验中流动相采用的浓度为0.3%的磷酸,是因为黄苓苷虽然在碱性溶液中更容易溶解,但容易氧化黄苓苷,因此使用酸性溶液更容易使黄苓苷洗脱。
经过本次研究的测量,得到河北承德的黄苓黄苓苷含量为301.499mg/g、山西岚县的黄苓黄苓苷含量为249.021mg/g由此可见,两地的黄苓中黄苓苷的含量具有明显的差异,以黄苓苷的含量为标准来判断,河北的黄苓质量要比陕西的质量好。于晶[5]等人也对河北和山西的黄苓汇总黄苓苷的含量进行了研究,发现虽然山西黄苓在植物的高度、根部的性状方面都比河北的好,但黄苓苷的含量与之相比略显逊色,这与本文的研究结果相吻合。
参考文献
[1]侯华新,黎丹戎,秦箐,张玮,邱莉,吴华慧.黄芩黄酮A对人肝癌细胞7402的抑制能力及体外增效作用[J].中国临床药学杂志,2011(23).
[2]温华珍,肖王义明,罗国安.HPLC 法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量[J].中草药,2013(16).
[3]周晓宁,杨滨.高效液相色谱-电化学检测法测定黄芩中3种有效成分的含量[J].中国中药杂志,2012,31(21):47-50.
[4]张箭,肖丽和,李发美.RP-HPLC法测定黄芩属四种药材中五个活性成分的含量[J].中药材,2012,28(15):389-391.
[5]于晶,陈君,肖新月.不同来源黄芩产量及质量性状的比较研究[J].中国中药杂志,2012,30(17):491-494.