【摘 要】
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目的构建和鉴定含有标记基因绿色荧光蛋白（GFP）的人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因真核表达载体,为基因治疗关节软骨缺损奠定基础。方法利用基因重组技术将GFP cDNA连接至pcDNA3
【机 构】
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吉林大学第一医院骨科,吉林省九台市人民医院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助课题(30400447)
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目的构建和鉴定含有标记基因绿色荧光蛋白（GFP）的人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因真核表达载体,为基因治疗关节软骨缺损奠定基础。方法利用基因重组技术将GFP cDNA连接至pcDNA3.1-IGF-1中,构建真核表达载体pcGI,然后限制性内切酶酶切鉴定。将pcGI转染成纤维细胞,经G418筛选,荧光显微镜、原位杂交和免疫细胞化学检测GFP和hIGF-1的表达,流式细胞仪检测细胞周期。结果酶切分析证明重组的pcGI质粒含有GFP cDNA和hIGF-1 cDNA碱基片段,方向及大小正确。转染后的
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