【摘 要】
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胁迫相关蛋白(stress associated proteins,SAPs)是具有A20结构域和(或)AN1结构域的一类锌指蛋白,广泛参与植物对逆境胁迫的响应.本研究通过同源克隆的方法获得陆地棉(Gossyp
【机 构】
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山西省农业科学院生物技术研究中心,太原030031棉花种质资源利用与分子设计育种山西省重点实验室,运城044000;山西省农业科学院生物技术研究中心,太原030031;
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胁迫相关蛋白(stress associated proteins,SAPs)是具有A20结构域和(或)AN1结构域的一类锌指蛋白,广泛参与植物对逆境胁迫的响应.本研究通过同源克隆的方法获得陆地棉(Gossypium hirsutum)GhSAP8基因(GenBank No.XM_016813997.1),全长519 bp,编码172个氨基酸,预测蛋白分子量为18.22 kD,等电点为7.51.GhSAP8包含1个A20和1个AN1结构域,是典型的SAP蛋白结构域组合方式.qRT-PCR检测结果显示,GhSAP8基因在叶片中表达量最高,盐胁迫处理使该基因表达量增加,提示其可能参与盐胁迫响应.将GhSAP8基因构建到植物表达载体pCAMBIA1300并进行拟南芥(Arabidopsis thaliana)转化,在150 mmol/L NaCl处理条件下,过表达GhSAP8的拟南芥存活率(53％～70％)显著高于野生型对照(27％),表明过量表达该基因可提高拟南芥的耐盐能力.另外,在盐胁迫条件下,盐胁迫相关应答基因Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因(Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase 1,AtP5CS1)、脱水诱导基因(responsive to desiccation 29 B,AtRD29B)、盐超敏感基因(salt overly sensitive 1,AtSOS1)和Na+/H+转运蛋白基因(sodium/hydrogen exchanger 1,AtNHX1)在转基因拟南芥中的基因表达量均显著高于野生型对照;而非盐胁迫条件下,转基因拟南芥中仅部分株系的AtP5CS1、AtRD29B和AtSOS1基因表达量高于野生型对照.上述结果提示,GhSAP8基因可能通过调控盐胁迫响应基因的表达来增强拟南芥的耐盐能力.本研究可为培育耐盐的转基因棉花提供候选基因.
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