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参照布氏锥虫次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)基因的核苷酸序列,设计合成了1对引物,引物间距为630bp,包含完整的HGPRT基因。以伊氏锥虫湖北水牛株总RNA为模板进行RT-PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳显示,获得1条长约630bp的特异性条带,符合设计要求。扩增片段克隆于pGEM-T Easy载体,经筛选鉴定,证明已获得了HGPRT基因阳性克隆。核苷酸序列分析表明,克隆的HGPRT基因在重