【摘 要】
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目的 通过建立B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)高表达转基因小鼠与野生型小鼠急性脊髓损伤组织的双向电泳图谱,比较蛋白质组的变化和差异表达,初步
【机 构】
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同济大学附属东方医院急诊外科,同济大学附属东方医院神经外科
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目的 通过建立B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)高表达转基因小鼠与野生型小鼠急性脊髓损伤组织的双向电泳图谱,比较蛋白质组的变化和差异表达,初步探讨Bcl-2保护脊髓损伤的分子机制.方法 转基因(A组)及同窝非转基因小鼠(B组)各15只,随机分为三组(1 d、7 d、14 d),采用垂直打击(weight dropping,WD)方法,以2.5×3.0 g·cm致伤力致伤小鼠脊髓.于术后1 d、7 d、14 d处死,取脊髓标本进行检测:①采用双向凝胶电泳分离脊髓总蛋白,建立双向凝胶电泳图谱;②用ImageMaster 软件分析图像,基质辅助激光解析电离飞行时间,质谱(MALDI2TOF2MS) 分析获取肽质量指纹图谱(PMF);③用Mascot软件系统和NCBIMS数据库检索确定蛋白质.结果 鉴定出差异蛋白质33个,其中1 d 8个,7 d 12个,14 d 13个.与B组小鼠比较,A组小鼠表达上调的蛋白质有热休克蛋白、含缬酪肽蛋白、peroxiredoxin 6等,下调的蛋白质为钙蛋白酶、泛素羧基末端水解酶-1等.多数差异蛋白质涉及到应激保护、抗氧自由基损伤、促进神经修复等过程,具有神经保护功能.结论 除了抗凋亡作用,Bcl-2蛋白可能还具有抗氧自由基损伤、促进神经修复、加强应激等多方面的神经保护功能.
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