用小鼠模型分析可溶性表达结核分枝杆菌Ag85A的免疫原性

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zskarl
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
【目的】可溶性表达结核分枝杆菌Ag85A蛋白,并评价其免疫原性。【方法】利用冷休克表达质粒和含有伴侣质粒的大肠杆菌对Ag85A蛋白进行可溶性原核表达,并进行纯化与鉴定,通过C57BL/6小鼠模型对Ag85A蛋白的免疫原性,包括诱导机体特异性体液免疫应答和细胞免疫应答水平进行分析。【结果】重组菌诱导后裂解上清中检测到可溶性Ag85A蛋白的表达,经过亲和层析纯化收获了纯度在90%以上的Ag85A蛋白,Western blot鉴定显示其具有较好的免疫反应性。Ag85A蛋白免疫小鼠后,血清中可以检测到高水平的Ig G抗体效价,其中Ig G2b水平要高于Ig G1。通过特异性多肽、蛋白刺激脾脏和腹股沟淋巴结细胞可分泌高水平的IFN-γ、TNF-α等Th1型细胞因子。【结论】实现了Ag85A蛋白的可溶性表达,免疫特性评价显示Ag85A蛋白可诱导机体产生强烈的特异性体液免疫应答及Th1型的细胞免疫应答,从而为其进一步免疫学功能的研究奠定了重要基础。 【Objective】 Soluble Mycobacterium tuberculosis Ag85A protein was expressed and its immunogenicity was evaluated. 【Method】 Soluble Ag85A protein was expressed in E. coli with cold shock expression plasmid and chaperone plasmid, and purified and identified. The immunogenicity of Ag85A protein in C57BL / 6 mouse model was evaluated by inducing body-specific humoral Immune response and cellular immune response levels were analyzed. 【Result】 The results showed that the soluble Ag85A protein was detected in the supernatant after induced by recombinant bacteria. The purity of Ag85A protein was over 90% purified by affinity chromatography. Western blot showed that Ag85A protein had good immunoreactivity. Ag85A protein immunized mice, the serum can detect high levels of Ig G antibody titers, which Ig G2b levels higher than Ig G1. Through specific peptides, protein-stimulated spleen and inguinal lymph node cells can secrete high levels of Th1-type cytokines such as IFN-γ, TNF-α and so on. 【Conclusion】 Soluble expression of Ag85A protein was achieved. Immunological evaluation of Ag85A protein showed that Ag85A protein induced strong humoral and Th1-type cellular immune responses, which laid an important foundation for its further immunological function.
其他文献
1912年10月,民国政府在北京创建了国立北京医学专门学校。1915年2月15日,国立北京医学专门学校附设诊察所在后孙公园正式开诊——这就是我国最早创办的国立医院。从此,栉风沐
医学心理学是一门与社会科学密切相关,前景远大的自然学科。其心理治疗在男性学及精神病学等方面得到广泛应用。近六年来,我院门诊针对70例癔性眼病进行心理治疗,收到满意效
由于秋苗发病面积小、病情轻,且西南地区、汉水流域等主要冬繁区冬季气温偏低、降水偏少,小麦条锈病冬季扩展缓慢。截至2月底(2013年2月27日),全国小麦条锈病冬繁面积为31.6
目的:对马尾伸筋草挥发油化学成分进行研究。方法:分别利用索氏提取法、超临界CO_2萃取法提取马尾伸筋草挥发油,并用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法进行测定。结果:从马尾伸筋草
作为学校教育的具体承担者,班主任的主要工作是面向学生,那么在教育过程中不可避免的会使用说教——这种以谈话为形式的教育,如不采取攻心之术,其效果将不甚显著。今笔者以自
音乐鉴赏能够陶冶情操,提高学生的人文素养和想象力,创造力等综合能力,在普通高校教育中得到了越来越多的重视。网络信息技术的发展推动了教育变革,普通高校利用互联网技术建
高等公共音乐教育学校普遍存在着存在着以下的这两个问题,首先学生方面音乐基础的不平等,不均衡;其次是教学中相关设施的欠缺。在这些条件的限制之下,想要出色的完成教学任务
白鲁恂(Lucian W.Pye,又译卢西安·派伊等),美国著名政治学家和中国学家。1921年生于中国山西,父亲为传教士。从小在中国长大,后回美国,就读于著名的卡莱顿教会学校,并在耶鲁
分析了以往气弹簧加工装配方法的缺陷,提出了用微机控制液压传动进行气弹簧生产的新方法,介绍了气弹簧成型机的特点,并就其重要组成部分的结构、功能作了分析。实践证明,气弹簧成
应用红宝石激光封闭渗漏点和散焦弱激光照射新生血管膜法,对24例28只眼黄斑部病变进行治疗,其中男16例,女8例,年龄24~6?岁.随诊1~24个月.结果表明,眼底病变明显好转;神经上皮下