【摘 要】
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目的 应用气-液界面(air-liquid interface,ALI)染毒技术,探讨摩托车尾气(motorcycle exhaust,ME)对呼吸道不同细胞的细胞器损伤和相对存活率的影响.方法 用20L Tedlar气袋收集洁净空气和ME.实验分为空白对照组、洁净空气组和ME组.空白对照组未做任何处理,洁净空气组为连接0.2 μm滤器后收集的含有21%O2和79%N2的人造空气,ME组为用气袋直接收集的ME.除了空白对照组,其余两组利用ALI体外染毒技术,在染毒流量为25 mL/min、37℃水浴条件下
【机 构】
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中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所,北京 100050
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目的 应用气-液界面(air-liquid interface,ALI)染毒技术,探讨摩托车尾气(motorcycle exhaust,ME)对呼吸道不同细胞的细胞器损伤和相对存活率的影响.方法 用20L Tedlar气袋收集洁净空气和ME.实验分为空白对照组、洁净空气组和ME组.空白对照组未做任何处理,洁净空气组为连接0.2 μm滤器后收集的含有21%O2和79%N2的人造空气,ME组为用气袋直接收集的ME.除了空白对照组,其余两组利用ALI体外染毒技术,在染毒流量为25 mL/min、37℃水浴条件下,对生长在ALI插件多孔膜上的BEAS-2B、A549和人肺巨噬细胞持续染毒60 min.利用透射电镜观察细胞内细胞器的损伤.利用CCK-8(cell counting kit-8)检测法评价细胞的相对存活率.结果 细胞电镜显示,对照组和洁净空气组的三种细胞细胞膜均为完整的单层膜结构;线粒体双层膜完整,线粒体嵴清晰可见;核内染色质分布均匀;洁净空气组中偶见少量自噬小体.ME暴露组中,可见BEAS-2B、A549和人肺巨噬细胞的细胞核膜萎缩,线粒体肿胀并伴有线粒体嵴消解和断裂现象,自噬小体的数量明显增多,自噬小体内可见吞噬的细胞器和众多膜泡状结构.BEAS-2B、A549和人肺巨噬细胞相对存活率分别为(61.65±6.23)%、(46.55±6.12)%和(40.89±1.59)%,与洁净空气组相比,3种细胞存活率均显著下降(P<0.01).方差分析提示,3种细胞存活率差异有统计学意义(F=62.91,P<0.01),细胞相对存活率呈现BEAS-2B>A549>人肺巨噬细胞的趋势.结论 BEAS-2B、A549和人肺巨噬细胞在气-液界面暴露于ME后可引起呼吸道细胞器结构的改变、细胞相对存活率的下降,对呼吸道不同细胞的细胞器和相对存活率存在显著影响.
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