PCR-DGGE技术分析浸矿体系细菌群落结构的实验优化

来源 :昆明理工大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:xjp_djx
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为了研究低品位黄铜矿细菌搅拌浸出的浸矿菌液中的细菌群落结构,对PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术相关的实验方法进行了优化,主要涉及低丰度基因组DNA提取方法优化、16S rRNA基因的PCR扩增条件优化以及变性梯度凝胶电泳条件的优化.结果表明,采用分级离心多次浓缩的方法收集矿浆样品中的菌体,再用试剂盒提取基因组DNA,有较好效果;使用含特定"GC夹板"的引物5'-CGCCCGCCGCGCCCCGCGCCCGTCCCGCCGCCCCCGCCCG-3'进行热启动降落PCR,能显著提高目的条带的PCR扩增
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