【摘 要】
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目的 探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)对小鼠急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的预防效果并初步探索其作用机制.方法 通过对接受全身辐照的雄性BALB/c小鼠移植雄性C57BL/6小鼠的骨髓细胞和脾脏细胞,构建小鼠异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSC
【机 构】
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400037重庆,陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院血液病医学中心,全军血液病中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室;563099贵州遵义,遵义医科大学第二附属医院检验科;400038重庆,陆军
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目的 探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)对小鼠急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的预防效果并初步探索其作用机制.方法 通过对接受全身辐照的雄性BALB/c小鼠移植雄性C57BL/6小鼠的骨髓细胞和脾脏细胞,构建小鼠异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)后aGVHD模型,建模部分实验分组:BM组[尾静脉注射500 μL供者C57BL/6小鼠骨髓细胞(5x 106/只)悬液]和aGVHD组[尾静脉注射500μL骨髓细胞(5×106/只)和脾脏细胞(5×106/只)混悬液].观察小鼠生存率、临床评分和体质量变化;流式细胞术检测移植后嵌合度;HE染色观察aGVHD靶器官(肺脏、肝脏、结肠、小肠)的病理学改变.收集P4代HUCMSCs,于移植当天混合供者骨髓细胞和脾脏细胞输注BALB/c小鼠,实验分组:①aGVHD组(处理同建模部分);②aGVHD+MSCs组[经尾静脉注射500μL骨髓细胞(5×106/只)、脾脏细胞(5×106/只)和HUCMSCs(5x105/只)混悬液].观察HUCMSCs对aGVHD的预防效果,应用ELISA检测各组小鼠血清IFN-γ、TNF-α浓度;流式细胞术检测CD4+T细胞在靶器官中绝对数计数和凋亡水平.结果 aGVHD组较BM组生存率降低、临床评分增高、体质量减轻明显(P＜0.05),靶器官病理损伤更为严重(P＜0.05);移植后小鼠达完全嵌合.HUCMSCs输注显著改善移植后小鼠生存、降低临床评分和靶器官病理损伤(P＜0.05),并降低血清炎症因子浓度(P＜0.05),增加CD4+T细胞在靶器官中的凋亡,CD4+T细胞绝对数计数显著下降(P＜0.05).结论 HUCMSCs联合allo-HSCT能有效预防及减轻小鼠aGVHD,其作用机制主要是HUCMSCs介导淋巴细胞凋亡,减少其在靶器官中的浸润和调控炎症因子分泌.
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